来丽娜，杨柳絮，郭春花，张晓一，王黎敏，范毅敏

肝纤维化是多种慢性肝病向肝硬化发展的必经阶段。现普遍认为肝纤维化属可逆性病变，但目前仍没有疗效确切且不良反应少的抗肝纤维化药物。我国中药资源丰富，从天然药物中发掘抗肝纤维化的药物具有广阔的前景。

青蒿素是从黄花蒿中提取的一种含内过氧化基团的倍半萜内酯化合物。青蒿素及其衍生物具有抗疟、免疫抑制、抗病毒及抗肿瘤等多方面药理作用，且不良反应较少［1］。青蒿琥酯(artesunate，Art)为青蒿素水溶性的衍生物。我们前期研究发现［2］，青蒿琥酯对CCl4混合因素所致的大鼠肝纤维化有防治作用，本实验制备免疫性大鼠肝纤维化模型，进一步探讨青蒿琥酯的抗肝纤维化作用及其可能机制，为其开发成抗肝纤维化药物提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物与HSC-T6细胞株 Wistar大鼠，♀♂各半，清洁级，体质量175 ～200 g，购自山西医科大学实验动物中心。HSC-T6细胞株由长治医学院肝病研究所赵中夫教授惠赠。

1.1.2 实验药品和试剂 青蒿琥酯，广西桂林制药二厂;秋水仙碱(colchicine，Col)，昆明股份制药有限公司，批号070509;不完全弗氏佐剂，Sigma公司产品;牛血清白蛋白(Albumin Bovine，BSA)，Amresco公司产品分装;羟脯氨酸(hydroxyproline，Hyp)，上海润成生物科技有限公司，分析纯，批号20090322。TGF-β1(Sigma公司)，RNAiso Plus抽提试剂(TaKa-Ra公司)，DL2000 DNA Marker(TaKaRa公司)，RNA PCR Kit(AMV)Ver3.0(TaKaRa公司)，Western细胞裂解液(碧云天生物技术研究所)，HRP标记的anti-Mouse IgG(Promega公司)，小鼠来源GAPDH一抗(碧云天生物技术研究所)，小鼠来源collagenⅠ一抗(Abcam公司)，PCR引物由上海生工生物工程公司合成。

1.2 方法

1.2.1 动物模型制备及分组 将弗氏不完全佐剂与同体积的18 g·L-1BSA生理盐水溶液混合并顺时针研磨制成9 g·L-1BSA弗氏不完全佐剂乳剂。……