银杏内酯B对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响
2011-11-29刘熹昀赵革新陈北冬齐若梅
刘熹昀,赵革新,鲍 利,陈北冬,吴 伟,齐若梅
动脉粥样硬化是心脑血管疾病致死的主要病理改变,涉及血管内皮细胞、平滑肌细胞,炎症细胞以及血小板。近年研究显示[1-3]血小板不仅参与动脉粥样硬化晚期的血栓形成,在动脉粥样硬化早期阶段通过释放炎症介质促进动脉粥样硬化的炎症反应。银杏内酯B(ginkgolide B,GB)是中药银杏叶提取物,早期研究显示GB能够特异性拮抗血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)受体,从而抑制血小板聚集、释放等功能[4]。本研究观察了GB是否能够减少血小板炎症介质释放,从而抑制ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化进展,以及 GB对ApoE-/-小鼠血浆 RANTES(regulated on activation,normal T-cell expressed and secreted)的影响。
1 材料与方法
1.1 材料 银杏内酯B购自江苏大观园商贸公司,纯度为95%(批号:BAT2007115)。高脂饲料购自北京科澳协力有限公司,含脂肪15%,胆固醇1.25%。RANTES ELISA检测试剂盒购自美国R&D公司。HE染色液购自北京试剂合力生物科技公司。油红O和OCT购自Sigma公司。Mac-3抗体购自Santa Cruz公司。
1.2 实验动物 24只8周龄♂ ApoE-/-小鼠和12只C57BL/6J小鼠购自北京大学实验动物中心[合格证号:SCXK(京)2006-0008]。ApoE-/-小鼠分为两组,模型组和GB药物组,每组12只,均给予高脂饮食,GB组每日灌胃给药0.6 mg,模型组以等体积的PBS的每日灌胃。C57BL/6J小鼠为正常组,以普通饮食喂养。喂养8周后处死,处死前禁食12 h,不禁水。
1.3 小鼠主动脉弓及胸主动脉油红O染色 实验小鼠被处死后从左心室缓慢灌流PBS,然后分离主动脉弓和胸主动脉,纵向剖开管腔后进行油红O染色。
1.4 小鼠主动脉弓及胸主动脉扫描电镜观察 实验小鼠被处死后从左心室缓慢灌流PBS,再用戊二醛体内固定,分离出主动脉弓及胸主动脉,纵向切开后体外固定、脱水、干燥。……
