睫状体平坦部滤过术房水引流途径的研究
2011-11-26唐由之
唐由之 王 影
睫状体平坦部滤过术是一种新的滤过术方法,经过临床及动物实验证实,具有降低难治性青光眼患者及慢性高眼压兔模型眼压的作用〔1〕,同时,由于手术部位在睫状体平坦部,该手术对于房水的葡萄膜巩膜引流途径亦可能存在影响。本实验利用异硫氰酸荧光素牛血清白蛋白(FⅠTC-BSA)作示踪剂注入前房,观察兔睫状体平坦部滤过术后荧光分布及动态变化,以揭示该手术房水引流途径,进一步阐明其降低眼压的机理。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物:健康青紫兰兔20只,普通级,雌雄兼用,体重2.0~3.0 kg,由北京市天坛生物制品有限公司动物实验室提供(生产许可证编号:SCXK(京)2004-0002)。
1.1.2 示踪剂(FⅠTC-BSA)配置方法:牛血清白蛋白(bovin serum albumin,BSA.美国 Sigma 公司)500 mg溶于50 ml浓度为0.05 mol/L的硼酸缓冲液(sodium borate buffer:pH=8.5),加入 0.25 mg 异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FⅠTC.美国 Sigma 公司)在室温下搅拌混合2h,置入透析膜以二次水透析,2d后取出冷冻干燥,得 FⅠTC-BSA(分子量 70 000,浓度6.42×10-4mol·L-1)(沈阳药科大学药剂实验室提供)。
1.2 方法
1.2.1 实验分组:20只兔中随机抽取10只,以右眼作为卡波姆模型手术组(A组),共10只眼;另外10只兔子的右眼作为单纯手术组(B组),共10只眼。所有兔的左眼除注射FⅠTC-BSA外,不进行其他操作,作为正常对照组(C组),共20只眼。
1.2.2 实验步骤:A组于前房内注入卡波姆0.12~0.15 ml,制作高眼压模型,观察眼压升高情况,10只眼眼压均超过25 mmHg,维持1周。然后,在同一天对A、B组行睫状体平坦部滤过术,麻醉方式为戊巴比妥钠全身麻醉,C组不进行任何操作。手术后1 d,向 A、B、C各组兔眼前房内注入微量 FⅠTC-BSA,在2、4、6、8、10 h 各处死 4 只兔(A 组 2 只,B 组 2 只),摘除眼球行冰冻切片,3 h后荧光显微镜下观察前部结膜、睫状体、房水池、脉络膜上腔、前后巩膜及脉络膜的荧光强度,确定房水流出途径(中日友好医院中心实验室完成)。……
