张 睿，陈国强，张敬友，朱 娜，蒋 原，姜 焱，唐泰山

（江苏出入境检验检疫局，江苏南京 210001）

1958年，人们就已在实验猕猴中发现猴痘病毒[1]。自1970年首次报导扎伊尔地区出现人的猴痘病例以后，非洲中西部雨林国家都有零星病例发生[2]，特别是1996年2月至1997年10月在刚果发生了有史以来的最大的一次疫情暴发，确诊病例达511人[3-4]，2003年5月美国威斯康星州报导有猴痘病例的发生[5-6]，至此猴痘引起了人们的高度关注。

猴痘是动物传播的一种以皮肤出疹为特征的热性病毒性疾病，通过直接密切接触，可由动物传染给人，并可在人与人之间传染，属人畜共患传染病。猴痘病毒检测方法有血清学方法，但猴痘病毒与痘病毒之间存在抗原交叉，特异性不够，不能准确检测猴痘病毒，此外还有病原分离方法，但检测周期太长，且猴痘病毒被分类为生物安全Ⅲ级生物因子，对实验室生物安全要求极高。因此，两种方法在实际应用中存在一定的局限性。利用PCR方法对猴痘病毒核酸进行检测，灵敏度高，快速仅需几小时即可得到结果，国外也已有相关报导[7-10]，但国内就此方面的报道还为数不多。本试验旨在建立更敏感和特异的猴痘病毒PCR检测方法。

1 材料与方法

1.1 材料

猴痘阳性模板为人工合成的MPV（AF380138）F3L基因片段（48 048~48 509 bp），插入质粒pUC57，由南京生兴生物技术公司合成。小鼠出血热病毒、小鼠淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒、鼠痘病毒、鼠仙台病毒、鼠肝炎病毒、鼠肺炎病毒、呼肠孤病毒、脑脊髓炎病毒、多瘤病毒、细小病毒、猴疱疹病毒Ⅰ型、羊痘、鸡痘、鸽痘等灭活病毒，购自中国药品生物制品检定所动物标准化室。……