王进香，王晓亮，周海宁，张玉玲，李知新，张成莲，闫小芹，吴亚文，李志红，王 磊，马 龙，周秀玲，宋权儒

（宁夏动物疾病预防控制中心，宁夏银川 750001）

猪流感（Swine Influenza，SI）是由A型流感病毒引起猪的一种急性、传染性呼吸道疾病，临床上以突发、高热、精神沉郁、食欲废绝、呼吸困难、阵发性咳嗽、衰竭、发病率高、死亡率低为特征。猪流感病毒（Swine Influenza Virus,SIV）还可以破坏猪的免疫系统而引起免疫抑制，导致其他疾病并发或继发感染，加剧病情与降低生产性能，给养猪业造成重大的经济损失。由于猪呼吸道上皮同时具有两种类型流感病毒受体。所以人和禽流感病毒都可以感染猪，猪是禽、人、猪流感毒基因重组的“混合器”，因此SI对于预防兽医学及公共卫生学均具有重要意义。为了解宁夏SI的流行状况，我们于2011年3—4月采集宁夏22个县（市、区）43个规模猪场、10个屠宰场、197个散养户的1710份血清样品，进行了SI的H1和H3亚型血清抗体检测，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 SIV H1、H3亚型血凝抗原和标准阴阳性血清均购自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。

1.1.2 被检血清 2011年3－4月采自宁夏22个县（区）43个规模场、10个屠宰场、197个散养户（不同年龄阶段）的猪血清样品1710份。

1.1.3 鸡红细胞悬液 以阿氏液作抗凝剂，无菌采集健康公鸡血液与等体积阿氏液混合，以1500 r/min离心10 min，弃去上清液和白细胞，重复洗涤3次，洗涤后用PBS配成1%（V/V）红细胞悬液，现配现用。

1.2 方法

1.2.1 血凝和血凝抑制试验 按使用说明书操作。

1.2.2 血清样品处理 待检血清样品经“胰酶－加热高碘酸盐方法”处理，以去除血清中非特异性凝集抑制因子。其步骤为：先加0.15 mL胰酶溶液于0.3 mL血清中，在56℃灭活30 min后冷却至室温；加0.9 mL高碘酸钾，混合，室温孵育15 min；加0.9 mL丙三醇盐溶液，混合，室温孵育15 min；加0.75 mL生理盐水并混合，置4℃保存备用。

1.2.3 血清样品检测 分别用H1、H3亚型血凝抗原同步检测每份血清样品，H1抗体效价大于或等于1:10者判为阳性。

2 结果

2.1 猪场SI抗体阳性率

在被查的22个县（区）250个猪场中，H1亚型SI抗体阳性率为24.0%（60/250），H3亚型SI阳性率为2.80%（7/250），H1+H3亚型 SI抗体阳性率为 0.80%（2/250），结果见表1。

表1 猪场SI抗体检测结果

2.2 血清样品SI抗体阳性率

在1710份被检血清中，H1亚型SI抗体阳性率为 11.81%（202/1710），H3亚型 SI抗体阳性率为0.46%（8/1710），H1+H3 亚型 SI抗体阳性率为0.35%（6/1710），结果见表2。

表2 血清样品SI抗体检测结果

3 小结与讨论

3.1 规模场SIV抗体水平

43个规模猪场均受到不同程度的H1和H3亚型SIV感染，H1亚型SIV抗体平均阳性率为46.51%（20/43）；H3亚型 SIV抗体平均阳性率为 0.465%（2/43）；H1+H3亚型SIV抗体平均阳性率为0%。

3.2 散养户不同年龄阶段猪的SIV抗体水平

散养户检测血清来自全区22县（市、区）197户，不同年龄阶段猪都存在SIV抗体，H1阳性率为16.75%（33/197）；H3亚型SIV抗体平均阳性率为1.52%（3/197）；H1+H3亚型SIV抗体平均阳性率为0.50%（1/197）。

3.3 屠宰场SIV抗体水平

10个屠宰猪场均受到不同程度的H1和H3亚型SIV感染，H1亚型SIV抗体平均阳性率为70.0%（7/10）；H3亚型SIV抗体平均阳性率为20.0%（2/10）；H1+H3亚型SIV抗体平均阳性率为10.0（1/10）%。

3.4 采用血凝抑制试验检测方法

采用该方法检测宁夏22个县（市、区）共1710份血清，按照试剂盒阳性判定标准，共有 202份阳性，阳性率为11.81%。由于目前我区猪群未免疫过猪流感疫苗，用血清学方法检测可以反应猪对流感病毒的感染状况，为猪流感的预防控制提供一定的基础数据。

3.5 禽流感病毒H5和H9亚型抗体检测

本次调查中从1710份猪血清中检出H5亚型禽流感病毒（AIV）抗体阳性1份，阳性率为0.05%；检出H9亚型禽流感病毒（AIV）抗体阳性3份，阳性率为0.17%。

3.6 猪场猪群的健康状况与猪场的环境，消毒隔离，人员素质等有密切的关系

在本次调查的几个猪场中，有的猪场抗体检测阳性率低，但有的猪场的阳性率很高。如固原市检测的两个猪场中，猪场1检测27份血清，阳性率为3.70%，猪场2检测22份血清，阳性率有59.09%。经调查，猪场1在养殖环境，猪场布局设计以及人员素质上均好于猪场2。

3.7 随着我国养猪业不断发展，猪只、人员流动大，应激因素多，因此象猪流感这类群发性传染病在我国各地猪场中普遍存在

猪呼吸道疾病成了困扰众多猪场的常见疾病，其中SIV是猪呼吸道疾病的主要病原之一，因其死亡率较低，往往不能引起养猪业者的重视，SIV还可引起怀孕母猪的繁殖障碍[1-2]，降低母猪的生产性能。同时，SI是猪的主要免疫抑制性疾病之一[3]，会破坏猪的免疫系统，导致免疫抑制，使得猪对其它疫病疫苗免疫应答能力下降，所以感染了SIV的猪易并发或继发其它疾病，使疫情加重和复杂，死亡率增高，经济损失严重。

3.8 当前甲型H1N1流感给人类健康构成了巨大威胁，我国对其研究给予了高度的重视

猪在禽-猪-人的流感种间传播过程中，起着中间宿主及多重宿主的作用，猪是人源、禽源和猪源流感的唯一共同易感宿主[4-6]，因此应加强对宁夏猪群中H1N1猪流感病毒的监测，密切注意流感的动向，以便及时预测及发现有可能引起流感大流行的病毒。

[1]Heinen P P，de Boer-Luijtze E A，Bianchi A T J.Respiratory and systemic humoral and cellular immune responses of pigs to a heterosubtypic influenza A virus infection[J].Journal General Virology，2001，82（11）：2697-2707.

[2]Choi Y K，Coyal S W，Joo H S.Prevalence of swine influenza virus subtyped on swine farms in the united states[J].Archives of Virology，2002，147（6）：1209-1220.

[3]Jake W.Immunosuppressive viruses a new pattern in pig disease[J].Pig International，1996，26（8）：27-28.

[4]黄胜斌，蒙雪琼，陈义祥，等.广西猪群H1和H3亚型猪流感病毒抗体水平调查[J].中国动物检疫，2008，25（7）：42.

[5]于康震，陈化兰，唐秀英.97香港禽流感[J].中国畜禽传染病，1998，20（3）：187-191.

[6]董玲娜.从“猪流感”到“甲型H1N1流感”看当前动物检疫工作[J].中国动物检疫，2009，26（11）：29-31.