伍慧兰

(湖南第一师范学院，湖南长沙410205)

湖南省泡状带绦虫线粒体nad1基因的序列测定及分析

伍慧兰

(湖南第一师范学院，湖南长沙410205)

以从我国湖南长沙和湘西犬小肠中采集的2条泡状带绦虫作为研究对象，用引物JB11及JB12扩增泡状带绦虫的pnad1片段，应用C lustalX 1.81程序对序列进行比对，同时利用DNAstar5.0中的Megalign程序进行同源性分析。结果显示来自湖南长沙和湘西的2条泡状带绦虫的pnad1序列均为391bp。研究结果为泡状带绦虫进一步的分类、鉴定和遗传变异研究奠定了基础。

泡状带绦虫；线粒体DNA；nad1基因；序列分析

泡状带绦虫（Taeniahydatigena）寄生于犬、狼和狐狸等动物的小肠内。绦期幼虫（细颈囊尾蚴，Cysticercus tenuicollis）寄生于猪、绵羊、山羊的肝脏浆膜、大网膜、肠系膜、肝、肺等处，对幼龄动物危害极大，偶尔也可感染人[1-2]。因此，正确鉴定泡状带绦虫，对预防和控制该病的发生具有重要意义。线粒体基因组具有结构简单、母系遗传、缺少重组、进化速率快等特点，特别适合作为遗传学研究的标记[3-5]。本研究以采自湖南长沙和湘西地区犬小肠中的泡状带绦虫为研究对象，对其nad1基因的部分序列(pnad1)进行PCR扩增和序列分析，旨在为泡状带绦虫的分类、鉴别诊断以及本病的防治等研究提供依据。

一、材料与方法

（一）材料

1.虫体样品：本研究所用的泡状带绦虫样品采自湖南长沙(CSTY1)和湖南湘西(XXTY1)。

2.主要试剂：Taq酶（大连宝生物公司产品），蛋白酶K（Merck公司产品）。WizardTMDNA Clean-up System（Promega公司产品）、PCR 试剂（Buffer、MgCl2、dNTPs）为大连宝生物公司产品。

3.样品DNA的制备：从70%酒精保存液中取出单个虫体，置于1.5mL Eppendorf管中。……