β-酪蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
2011-11-05卢士英任洪林李岩松柳增善刘文迪郝亚明
中国实验诊断学 2011年8期
宋 芳,周 玉,卢士英,任洪林,李岩松,柳增善,刘文迪,郝亚明
(人兽共患病研究教育部重点实验室,吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春130062)
牛奶具有丰富的营养价值,牛奶中含有多种人类赖以生存的营养素,包括水、蛋白质、脂肪、碳水化合物、矿物质、维生素等,是人类最理想的天然食品。然而近些年来,随着乳制品产量的逐渐上升,乳品掺假现象也时有发生,严重危害消费者健康。牛奶中最重要的营养指标是蛋白质,蛋白质的传统测定方法是凯氏定氮法,该方法只能测出氮的总量而不能确定氮的来源和种类,所以存在一定的缺欠,这使得不法商人将低价含氮物质如尿素、三聚氰胺、硝酸盐、亚硝酸盐、白矾、豆浆等[1]掺入牛奶中,以达到牛奶中蛋白质含量的检测标准。
牛奶中的蛋白质是奶中主要含氮物质,含量为2.8%-3.8%,其中95%是乳蛋白质,牛乳蛋白质中大约80%是酪蛋白,β-酪蛋白在酪蛋白中比例恒定,结构相对稳定[2]。因此,如果能直接检测牛奶中β-酪蛋白的含量,可使得在牛奶中添加含氮类非食品添加剂的行为变得毫无“意义”。
目前,牛奶中β-酪蛋白的检测方法有酪蛋白等电点沉淀法[3]、毛细管电泳法[4]、酶联免疫吸附测定法[5]等,这些方法的缺点是依靠昂贵的仪器设备和专业化的实验操作人员,不便以普及和推广。基于单克隆抗体的ELISA检测方法具有特异性强、操作简单、不需要昂贵的仪器设备和专业化的实验操作人员等优点。本试验制备了β-酪蛋白的单克隆抗体并对其特性进行了鉴定,为牛奶中蛋白质的ELISA检测方法奠定基础。……
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