虞红珍, 祝 敏, 王 豫, 徐勤枝, 吴 强, 周平坤△

(1安徽医科大学病理学教研室, 安徽 合肥 230032；2军事医学科学院放射与辐射医学研究所，北京 100850 )

hHBrk1与WAVE1蛋白相互作用位点的鉴定*

虞红珍1,2, 祝 敏2, 王 豫2, 徐勤枝2, 吴 强1△, 周平坤2△

(1安徽医科大学病理学教研室, 安徽 合肥 230032；2军事医学科学院放射与辐射医学研究所，北京 100850 )

目的鉴定微丝相关蛋白hHBrk1与WAVE1的结合位点。方法利用PCR的方法克隆人WAVE1及各结构域的基因片段，并将之亚克隆至真核表达载体；免疫共沉淀技术检测hHBrk1与WAVE1结合位点。结果获得了WAVE1及各结构域基因的真核表达载体；免疫共沉淀发现hHBrk1与WAVE1的Scar同源结构域(SHD)结合，而WAVE1蛋白结合于hHBrk1的羧基端，羧基端七肽重复(HR)结构域点突变后获得的蛋白失去了与WAVE1的结合能力。结论hHBrk1可能通过HR结构域与WAVE1的SHD区结合，参与WAVE1蛋白的细胞亚定位或维持其稳定性，从而调控肿瘤细胞的迁移。

蛋白质，hHBrk1; 蛋白质，HSPC300; 蛋白质，WAVE1

微丝与细胞形态的维持和运动有着密切关系，恶性转化细胞常表现为细胞骨架的破坏和微丝聚合的异常，恶性肿瘤细胞胞浆中微丝聚合增多可促进肿瘤细胞的侵润、转移[1-4]。因此研究肿瘤侵润、转移的机制，寻找新的肿瘤运动相关基因，可为抗肿瘤转移的生物治疗提供靶点。hHBrk1蛋白在肿瘤组织中高表达，参与肿瘤细胞的迁移[5]；研究发现hHBrk1是微丝聚合关键蛋白WAVE1复合物的成员之一， WAVE1复合体为五聚体，由WAVE1、PIR121、Nap125、HSPC300/hHBrk1和Abi2同源蛋白共同组成[6，7]，其复合物各亚单位之间相互作用的可能机制见图1[8]；而HSPC300结合在WAVE1蛋白的SHD结构域，在WAVE1蛋白的定位和稳定性方面发挥着重要作用[9]。……