红花黄色素对氧自由基引起人红细胞膜损伤的保护作用
2011-09-20王媛凯张立伟
周 璐,王媛凯,张立伟
(山西大学分子科学研究所,山西太原030006)
红花为菊科植物Carthamus tinctorius L.的干燥花瓣,为常用的活血化瘀中药。红花黄色素(SY)是红花活血作用的主要有效部位,能够改善心肌及脑组织微循环障碍,临床上被大量应用于冠心病和心绞痛的治疗[1]。羟基红花黄色素A(HSYA)和红花黄色素B(SYB)是SY中含量较高的查耳酮类成分,也是SY发挥药理作用的主要物质[2]。文献报道,HSYA具有保护心脑[3-4]和拮抗血小板激活因子受体的作用,可明显抑制血小板内游离钙离子浓度升高[5];SYB可明显抑制ADP诱导的大鼠体外血小板聚集率并可延长大鼠凝血时间[6]。近来研究发现HSYA具有一定的抗氧化作用,可清除羟自由基,抑制脂质过氧化反应[7]。为了探讨HSYA和SYB防治心血管疾病及抗氧化作用的机制,本文进行了HSYA和SYB对外源O2-.所致红细胞膜氧化损伤的保护作用的研究。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 药品与试剂 DPH探针(1,6-二苯基-1,3,5己三烯)为Sigma-Aldrich公司产品,以四氢呋喃配成2 mmol/L溶液,装入棕色瓶中置4℃冰箱中保存,临用前用PBS稀释成2×10-6mol/L;考马斯亮蓝试剂盒购自南京建成生物工程研究所;邻苯三酚购自天津市申泰化学试剂有限公司;维生素C为新乡市常乐制药有限公司生产;其他试剂均为国产分析纯。新鲜血液由山西大学校医院提供。PBS缓冲液(10 mM)的配制:NaCl 125 mM,KCl 2.7 mM,Na2HPO48 mM,KH2PO41.5 mM,glucose 10 mM,pH 7.4。
1.1.2 实验仪器 CR-22G型高速冷冻离心机(HITACHI公司);TGL-16M高速台式冷冻离心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司);Cary-50Bio紫外可见分光光度计(美国瓦里安技术中国有限公司);荧光光度计LS-50B(PE公司)。
1.2 实验方法
1.2.1 药物的提取纯化 HSYA、SYB的提取纯化:红花干燥粉末,加30倍水60℃提取2次,每次45 min,合并提取液,滤过,50℃减压浓缩;……
