颜秉兴，孟英红，孙迎军，李建军

濮阳市油田总医院检验科濮阳457001

(2010-12-16收稿 责任编辑 徐春燕)

碳青霉烯类药物因抗菌谱广、稳定性强、能抵御最常见的产β-内酰胺酶菌，已成为治疗多重耐药革兰阴性菌感染的最后手段。在临床治疗中缺乏一种非常有效的药物抵御碳青霉烯类多重耐药菌株，两种或多种抗菌药物联合应用有望产生协同效应。多黏菌素B(PB)、强力霉素(DOX)及利福平(RIF)等已单独和(或)联合应用于治疗多重耐药菌株［1］。作者采用棋盘微量稀释法观察了PB与几种抗菌药物联合抵御耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的协同作用。

1 材料与方法

1.1 菌株来源与保存 2004年1月至2010年10月濮阳市油田总医院保存的16株碳青霉烯类耐药菌，其中肺炎克雷伯菌11株，大肠埃希菌5株，均来自不同患者。使用Vitek 2 Compact和API 20E条鉴定菌株。菌株于脑心浸液肉汤中－80℃保存，试验前在含体积分数5%的绵羊血平板上转种2次。

1.2 培养基、抗菌药物和质控菌 培养基:MH琼脂和MH肉汤为法国生物梅里埃公司产品。抗菌药物:PB、RIF、DOX、头孢吡肟 (FEP)、头孢曲松(CRO)、庆大霉素(GM)购自北京生物制品检定所，亚胺培南(IMP)为默沙东公司产品。质控菌:大肠埃希菌ATCC25922。

1.3 部分抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index，FICI)的计算

1.3.1 初筛 利用 Vitek 2 Compact对耐 IMP菌株进行筛选，初筛阳性菌株进一步检测该菌对包括IMP在内的各种药物的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration，MIC)值。

1.3.2 棋盘微量稀释法测定MIC及抗菌药物联合试验 ①用96孔U型微量板(棋盘)分别测定拟联合的抗菌药物对检测菌的MIC值。②根据测定的MIC值确定药物的稀释度，最高浓度为2×MIC。……