张 祥，阚全程#，余祖江，王 鹏

1)郑州大学第一附属医院药学部郑州 450052 2)郑州大学第一附属医院感染科 郑州 450052 3)郑州大学护理学院郑州 450001

#通讯作者，男，1963年9月生，博士，教授，主任药师，研究方向:免疫药理，E-mail:sennheiser163@163.com

PreS-Tat真核表达载体的构建及表达*

张 祥1)，阚全程1)#，余祖江2)，王 鹏3)

1)郑州大学第一附属医院药学部郑州 450052 2)郑州大学第一附属医院感染科 郑州 450052 3)郑州大学护理学院郑州 450001

#通讯作者，男，1963年9月生，博士，教授，主任药师，研究方向:免疫药理，E-mail:sennheiser163@163.com

PreS;Tat;乙型肝炎病毒;蛋白转导区

目的:构建pEGFP-PreS-Tat嵌合载体并在真核细胞中表达。方法:提取人乙型肝炎病毒并用PCR法扩增出PreS片段，定向克隆入pEGFP-C3载体，在PreS下游连接合成的Tat序列，构建成功的pEGFP-PreS-Tat质粒经脂质体转染Hela细胞，Western blot鉴定目的蛋白的表达。结果:酶切和测序结果表明成功地构建了pEGFP-PreSTat嵌合载体，Western Blot结果表明该载体能在Hela细胞中表达pEGFP-PreS-Tat融合蛋白。结论:成功构建pEGFP-PreS-Tat载体并表达出相应的融合蛋白，为研究该融合蛋白的功能奠定了基础。

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)是引起病毒性肝炎最常见的病原体，全球目前大约有3.5亿慢性HBV携带者［1］，中国HBV表面抗原携带率为9.75%。随着病情的发展，每年有超过100万人死于慢性活动性肝炎、肝硬化及原发性肝癌等肝脏疾病或相关并发症［2］。然而目前用于肝病治疗的药物如干扰素类、胸腺肽类及核苷酸类似物并不能完全清除HBV。近来肝脏疾病特异性药物与基因治疗已显示出一定的前景，其中目的蛋白的靶向性一直是肝脏疾病药物与基因治疗研究领域的重要研究方向［1］。……