宋新强，汪学群，易朝辉，郑 健，韩俊刚，刘承丽，张亚可，彭玉玲，马 云

1)信阳师范学院生命科学学院信阳464000 2)信阳市第一人民医院风湿免疫科信阳464000 3)信阳职业技术学院信阳464000

(2010-11-28收稿 责任编辑 赵秋民)

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种以关节滑膜慢性炎症为主的自身免疫性疾病，其病因及发病机制尚未完全明确，遗传和环境因素都有可能导致该病的发生与发展［1］。一部分遗传因素来自于人类主要组织相容性复合体(HLA)Ⅱ类基因，也有研究［2］表明，HLAⅢ类基因的一些区域也与RA的易感性有关。肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)基因位于 HLAⅢ类基因区，由4个外显子和3个内含子组成，含有许多多态性位点，包括微卫星DNA和单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)。到目前为止，已经发现有 14个 SNP位点(－1031 T/C，－863 C/A，－857 C/T，－851 C/T，－419 G/C，－376 G/A，－308 G/A，－244 G/A，－238 G/A，－163 G/A，－49 G/A，+489 G/A，+851 A/G，+1304 A/G)和6个微卫星位点［3］。目前，已有关于TNF-α基因SNPs与RA的相关性研究，但是，很多结论却完全相反［4-7］。作者以豫南地区人群作为研究对象，分析TNF-α基因启动子－308 G/A多态性与RA发生、发展之间的关系。

1 对象与方法

1.1 研究对象 RA组90例，其中女60例，男30例，均为汉族，年龄 18 ～75(33.5 ±3.2)岁，为信阳市第一人民医院2008年至2010年住院及门诊确诊的患者，病程5个月～15 a。诊断符合美国风湿病协会(ACR)1987年诊断标准，其中无侵蚀性病变者32例，有侵蚀性病变者58例。正常对照100例，女60例，男40例，均为汉族，年龄18～60(34.2±4.6)岁，为信阳师范学院校医院门诊体检健康者。

1.2 标本采集及基因组DNA的提取 抽取受试者外周血2 mL，加EDTA抗凝后－20℃冰冻保存。用酚/氯仿抽提法提取基因组 DNA，其 A(260nm)/A(280nm)为1.6 ～1.8，使用时 DNA 终质量浓度为100～300 μg/L。

1.3 TNF-α－308 G/A 的PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析 根据文献［8］设计引物，上游引物序列:5’-AGGCAATAGGTTTTGAGGGCCAT-3’，下游引物序列:5’-TCCTCCCTGCTCCGATTCCG-3’。……