苏建华，林 伟，陈玉芳，丁新生，唐金荣，肖 杭，包德诚

1)江苏大学附属金坛医院神经内科金坛213200 2)常州市第四人民医院病理科常州213001 3)南京医科大学第一附属医院神经内科南京210029 4)南京医科大学应用神经毒理研究所南京210029

(2010-04-13收稿 责任编辑 李沛寰)

细胞凋亡的分子机制极其复杂，血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)有助于神经元免受低氧和糖缺失的损害，并且能刺激轴突生长和改善背根神经元的存活，从而直接发挥神经保护作用［1-3］。丁咯地尔是一种血管活性药物，能阻滞血管平滑肌肾上腺素能受体兼弱Ca2+拮抗作用［4-5］，其对周围神经损伤后神经元有确切的保护作用［6］。作者建立周围神经嵌压伤动物模型，以丁咯地尔预处理后应用TUNEL法和免疫组织化学SP法检测不同时间点细胞凋亡和VEGF表达的变化，探讨丁咯地尔对周围神经损伤后神经元保护的作用机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂和仪器 丁咯地尔(批号021104，南京金陵药业有限公司产品)，免疫组织化学SP试剂盒和DAB显色试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司，TUNEL凋亡试剂盒(武汉博士德公司产品)，其他试剂为国产分析纯。常规神经分离设备一套由东南大学医学院解剖学教研室提供。

1.2 大鼠周围神经嵌压伤动物模型的建立 参照Patro等［7］的方法制作周围神经嵌压伤动物模型:大鼠用30 g/L戊巴比妥10 mL/kg麻醉，仰卧固定于鼠板上，于右后肢腹股沟处切开皮肤1 cm，钝性分离肌肉组织，显露坐骨神经，挤压坐骨神经，持续30 s，关闭切口，常规注射青霉素预防感染。……