张 震，付 聪，王冰一，窦蒙蒙，赵继敏，黄幼田，赵明耀#

1)郑州大学临床医学系郑州450001 2)郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450001

(2010-12-31收稿 责任编辑 李沛寰)

地塞米松(dexamethasone，DEX)和活性维生素1，25-(OH)2D3是临床和实验中使用的肿瘤诱导分化剂，分属类固醇类激素和非类固醇类激素两大家族，前者的受体是在细胞质内，后者的受体是在细胞核内。它们作为配体在转录因子的基因表达调控上有明显的不同。作者观察了这2种药物单独及联合使用对食管鳞状细胞癌EC1细胞的增殖与细胞周期的影响，报道如下。

1 材料与方法

1.1 试剂和细胞 RPMI 1640培养基(美国Gibco公司)，胎牛血清(天津 TBD 公司)，DEX、1，25-(OH)2D3、RNase、MTT 和 DMSO(美国 Sigma公司)，EC1细胞(郑州大学基础医学院病理生理学教研室惠赠)。DEX和1，25-(OH)2D3均采用无水乙醇溶解，配置成10－4mol/L储存液，使用时用培养液稀释成相应的工作浓度。

1.2 细胞培养和分组 EC1细胞在含体积分数为10% 胎牛血清、100 U/mL青霉素和100 mg/L链霉素的RPMI 1640完全培养基中，置于37℃、体积分数5%CO2及饱和湿度条件下培养。待细胞汇合至70%～80%时，用胰蛋白酶消化，制备成单细胞悬液。①溶剂对照组:体积分数0.1%的无水乙醇作用EC1细胞。②DEX组:用10－7mol/L DEX处理EC1 细胞。③1，25-(OH)2D3组:用 10－7mol/L 1，25-(OH)2D3处理EC1细胞。④联合用药组:10－7mol/L DEX 和 10－7mol/L 1，25-(OH)2D3处理 EC1细胞。各组细胞经药物作用48、72和96 h后，在倒置显微镜下观察并拍照。

1.3 EC1细胞增殖抑制实验 采用MTT法。将制成的单细胞悬液，按1.5×104L－1的密度分别接种到3块96孔培养板中，培养24 h;按1.2分组分别加药处理细胞，每组设3个复孔，再分别培养48、72和96 h;每孔加入5 g/L的MTT溶液20μL，继续培养4 h;吸去上清，加入200μL DMSO，室温下振荡10 min使紫色结晶全部溶解，在96孔酶标仪上以空白对照孔调零，570 nm处读取吸光度(A)值。……