赵富周，杨鲲鹏，庞志刚，张 典，谷 博

郑州大学第二附属医院胸外科郑州450014

(2011-01-07收稿 责任编辑 徐春燕)

食管癌是消化道常见的恶性肿瘤之一，早期即可发生淋巴管转移［1］。迄今为止，关于食管癌淋巴管的生成和淋巴结转移的具体机制尚不十分清楚。缺氧是不同来源的实体肿瘤的常见现象，缺氧环境下肿瘤细胞可通过缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor，HIF)提高其对缺氧的耐受性并刺激下游基因血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的表达，从而促进血管淋巴管的生成;趋化因子受体(chemokine receptor，CCR)与其配体结合可以促进肿瘤细胞的增殖，肿瘤血管、淋巴管的生成以及肿瘤细胞定向迁移［2-4］。作者应用免疫组化法检测了食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma，ESCC)组织及癌旁正常食管黏膜组织中HIF-1α、CCR7及VEGF-C的表达，探讨3者与ESCC侵袭和淋巴结转移的关系。

1 材料与方法

1.1 材料 45例ESCC标本均为郑州大学第二附属医院手术切除且经病理证实。45例患者中男24例，女21例;年龄41～73岁，中位年龄58.3岁。肿瘤直径＜3 cm 23例，≥3 cm 22例;高、中分化24例，低分化和未分化21例;病理分期:Ⅰ、Ⅱ期14例，Ⅲ、Ⅳ期31例;伴有淋巴结转移30例。每例标本均同时取癌旁正常食管黏膜组织作为对照。

1.2 2种组织中 HIF-1α、CCR7和 VEGF-C 蛋白的检测 采用免疫组化SP法。鼠抗人HIF-1α单克隆抗体购自BD公司，羊抗人CCR7多克隆抗体购自Santa Cruz公司，兔抗人VEGF-C多克隆抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司，SP试剂盒和DAB显色试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司。切片常规脱蜡，微波抗原修复，HIF-1α抗体和CCR7抗体按1-100稀释，VEGF-C抗体按1-200稀释，操作按试剂盒说明进行。用已知的ESCC阳性切片作阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。……