集合PCR方法在艾滋病自愿咨询检测(VCT)人群中的应用研究
2011-09-12杨朝军马艳玲包佑红闫文云
杨朝军,杨 莉,马艳玲,陈 玲,包佑红,闫文云
(云南省疾病预防控制中心,云南 昆明 650022)
云南省自1989年首次发现成批HIV感染者以来,截止2009年10月底,全省共发现HIV感染者72939人(含外籍3192人)。近几年由于加大监测检测力度,每年新发现HIV感染者近万人,值得一提的是,艾滋病自愿咨询检测(VCT)已经成为发现HIV感染者的重要途径和手段。
云南省疾病预防控制中心VCT门诊自2002年开展工作以来,共检测20002人份,检测出5106(25.5%)份HIV抗体阳性,检测阳性率从2002年的15.6%逐渐上升到2009年的29.6%。在咨询过程中,常常有许多求询者的暴露时间不足3个月,尚不能采用常规的HIV抗体检测的方法,而这部分求询者急于知道感染情况,会谎称已过窗口期。为了及时发现处于窗口期的感染者,本研究尝试采用集合PCR的方法对VCT人群进行HIV核酸检测分析,现将情况报告如下。
1 材料与方法
先把50份HIV抗体筛查为阴性的样本集合成一份样本,每10份样本各取130ul混合组成1个二级集合,在5个二级集合中各取210ul混合组成1个一级集合。再用RT-PCR方法(COBAS Amplicor HIV-1 Monitor 试剂)检测一级集合的HIV RNA,如果结果为阳性,则对5个二级集合检测 HIV RNA,如果有阳性,则对该集合中的10个样本分别检测HIV RNA。如果为阴性则判为未检测到HIV核酸。
2 结果
对2009年HIV抗体筛查为阴性的VCT人群样本及时进行集合PCR检测,即每天分离阴性样本的血浆并保存于零下20度冰柜中,每周进行1次集合并检测HIV RNA,以保证及时发现感染者并通知阳性结果。在1600份集合样本中检测到1份HIV RNA阳性样本,发现1个处于窗口期的HIV感染者,病毒裁量高达70万copy/ml,对该人员的回访调查中发现,他于检测前2周有过1次高危性行为。……
