张蕊 周博 李贤宇 （天津渤海职业技术学院 天津300402）

虾青素的化学名称为3,3'-二羟基-4,4'-二酮基-β,β'-胡萝卜素，分子式为C40H52O4（见图1），相对分子量为596.86，是一种天然非维生素A原的类胡萝卜素，广泛存在于虾蟹、鲑鱼和某些藻类及真菌中，常用作鱼虾等水产养殖动物的饲料添加剂。[1]动物实验表明虾青素有抑制肿瘤发生、增强免疫功能、延缓衰老等多方面的功能，在功能食品、饲料、化妆品和医药等方面有着广阔的应用前景。[2-4]

图1 虾青素的结构式

红法夫酵母可以发酵糖类产生虾青素，最初于1970年在美国阿拉斯加的高山和日本北海道一带山区落叶松的渗出液中分离得到。红法夫酵母有生长速度快、容易实现细胞高密度培养以及提取色素后的酵母细胞可以作为饲料添加剂等优点，已越来越受到人们的重视。但红法夫酵母的野生型胞内虾青素含量比较低，一般为0.05%细胞干重，要进行连续化生产最终实现较高的经济效益，必须对红法夫酵母原始菌株进行改造，以达到增产的目的。

1 材料与方法

1.1 实验材料和仪器

1.1.1 菌种 红法夫酵母（Phaffia rhodozyma），中科院微生物所提供，编号As2.1557。

1.1.2 培养基 摇瓶发酵培养基比例：葡萄糖20，酵母粉3，蛋白胨5，pH值自然。

1.1.3 主要仪器 紫外诱变箱（自制），高速离心机（北京医用离心机厂），回转式恒温调速摇瓶柜（上海欣蕊自动化设备有限公司），高效液相色谱仪（美国Laballiance公司）。

1.2 实验方法

1.2.1 紫外诱变 ①菌体前培养[5]：取活化后斜面种子1环接至盛有30 mL种子培养基的250 mL三角瓶中，20℃，160 r/min振荡培养48 h。然后取培养液5 mL接至盛有50 mL摇瓶发酵培养基的500 mL三角瓶中，20℃，160 r/min振荡培养24 h，使细胞处于对数期后期。……