孟庆云,吴祥红,顾镜月

(佳木斯大学附属第一医院儿一科,黑龙江佳木斯 154003)

支气管哮喘(简称哮喘)是儿科呼吸系统的常见病,肺炎衣原体是引起小儿呼吸道感染的常见病原体之一,为了解哮喘患儿哮喘发作时与肺炎衣原体急性感染之间的关系,作者对188例发作期哮喘患儿进行了CP—IgM及C P实时荧光定量PCR检测,现将结果报道如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料

2008—06～2011—01我科收治的哮喘急性发作的 188患儿作为哮喘组,均符合哮喘诊断标准[1],对其均进行咽拭子 C P实时荧光定量 P C R检测及血清 C P—I g M检测;其中男103例,女 85例;年龄 ＜3岁 79例,3～5岁40例,＞5岁 69例。另外选取同期住院的非呼吸道感染者为对照组,其中男34例,女 19例,共 53例;年龄 ＜3岁 22例,3～5岁 13例,＞5岁 18例。

1.2 方法

1.2.1 标本采集:咽拭子是于入院后即在生理盐水漱口后采集;血清学标本是在患儿入院后第 2日清晨采集空腹静脉血2m L。

1.2.2 血清学检测:采血后即离心标本,取其血清于冰箱冷冻保藏,然后在 48h内运用北京晶美基因谷科技有限公司CP—1gM抗体ELISA试剂盒,在经过孵育、洗涤、酶联物结合后再洗涤,并加底物显色,最后加终止液上酶标仪(450n m波长)测定O D值。若待检标本孔OD值≥弱阳性对照孔OD值的1.1倍,则判定为阳性;≤弱阳性对照孔OD值的0.9倍为阴性;在弱阳性对照孔OD值上下10%内则再检测一次,如确实高于弱阳性对照则判为阳性。对于CP—Ig M阳性者可判定为 C P急性感染。

1.2.3 实时荧光定量PCR:取咽拭子后置于无菌玻璃管,密封送检。采用肺炎衣原体核酸扩增荧光检测试剂盒(中山大学达安基因股份有限公司),进行D N A的提取及PCR扩增,并由电脑自动分析,计算出荧光定量结果。……