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甲型副伤寒杆菌重组蛋白Omp W的表达与鉴定*

2011-08-21林飞飞冯康乐雷银蕉戎春浩

中国人兽共患病学报 2011年11期

林飞飞,冯康乐,雷银蕉,戎春浩,盛 思,阮 萍

沙门菌(Salmonella)是一类兼性胞内寄生菌。沙门菌血清型众多,其中伤寒沙门菌和副伤寒沙门菌感染引起的伤寒和副伤寒是发展中国家高发的肠道传染病,每年导致近60万人死亡,我国每年报告伤寒及副伤寒病例数近2万例。近年来,甲型副伤寒沙门菌在我国开始流行,在一些省或自治区人群中超过伤寒沙门菌而成为优势菌型[1-2],且甲型副伤寒沙门菌耐药性逐年增强。目前我国普遍采用以荚膜多糖为抗原的Vi疫苗来预防伤寒或副伤寒,但甲型副伤寒杆菌无多糖荚膜,故Vi疫苗无预防甲型副伤寒效果[3]。因此,筛选甲型副伤寒杆菌保护性表面蛋白抗原,进而研制甲型副伤寒疫苗,对于预防和控制甲型副伤寒的流行具有重要意义。

外膜蛋白(outer membrane proteins,OMP)通常是沙门菌等革兰阴性细菌主要表面抗原之一。根据甲型副伤寒杆菌全基因组序列[4],该菌至少有21个OMP编码基因,其中肯定的主要OMPs有spaO、omp A、omp C、omp N、ompS、omp W、nmp C等,根据查阅文献,spaO、omp A和nmp C等已有报道或正在研究之中,故根据甲副伤寒杆菌ATCC9150株全基因组序列中对omp W基因产物“Surface antigen”的诠释,我们选择了omp W作为研究对象,进行其基因产物的研究。本研究中,我们检测了我国甲型副伤寒杆菌临床菌株中omp W基因携带率,构建了omp W基因原核表达系统并鉴定了重组表达产物r Omp W的免疫原性,以期为r Omp W用作甲型副伤寒杆菌基因工程疫苗抗原提供依据。

1 材料与方法

1.1 菌株来源及培养 甲型副伤寒杆菌参考标准株50001购自北京中国药品生物制品检定所。……

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