李 翔，李 莉，程均福，李国明，崔步云

2.华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科，武汉430030；

3.中国疾病预防控制中心传染病预防控制所，北京10226

布鲁氏菌病（布病）是由布鲁氏菌（布氏菌）感染机体引起的人兽共患的自然疫源性疾病［1］。湖北省曾于上世纪90年代初对全省职业人群的布病疫情分布进行调查，血清学检测结果显示，荆州、孝感、襄樊和直辖市林区4地有布病感染者［2］；2007年，湖北省枣阳市疾病预防控制中心曾报道1例输入性布鲁氏菌病［3］，但上述均未得到病原学证实。2010年12月我们首次从1例疑似患者脊髓液中分离到1株疑似布鲁氏菌菌株，对该菌株的种、型及生物学特性的研究对我省的布病防治工作具有重要的指导意义。

1 材料和方法

1.1 材 料

1.1.1 实验菌株 从疑似患者体内用需氧培养管，全自动血培养仪分离菌株QTB1001，血平皿分离保存，该菌株在营养琼脂上不生长，菌株由武汉同济医院检验科提供。

1.1.2 参考菌株 布鲁氏菌标准菌株牛种菌544A、羊种菌16 M、猪种菌1330S及羊种M5疫苗株由中国疾病预防中心传染病预防控制所（传染病所）提供。

1.1.3 实验试剂 布氏菌阳性血清；A、M因子血清；R型布氏菌血清；布氏菌噬菌体Tb和BK2；1∶5万（20μg/mL）硫堇、碱性复红染料纸片；硫化氢滤纸片；布氏琼脂（美国BD公司）；TRANS 2x Easy Taq Super Mix（全式金生物技术有限公司）；QIA DNeasyblood＆Tissue kit（Qiagen公司）均由传染病所提供。

1.1.4 扩增引物 以下引物均由上海生工生物工程公司合成

1.1.5 实验仪器 Senso Quest labcycler PCR仪（圣欧国际有限公司，德国）。

1.2 方法

1.2.1 布鲁氏菌属常规种型鉴定 硫化氢产生，硫堇、碱性复红抑菌实验，阳性血清、A、M 和R血清凝集实验，布氏菌噬菌体裂解实验，均参照卫生部疾病预防控制局编著《布鲁氏菌病防治手册》［4］。……