张 姝，莫 非，孙朝琴，张 然，王 莹，李 寅，罗昭逊，夏曙华

幽门螺杆菌是浅表性胃炎、消化性溃疡的致病因子，与胃癌、胃粘膜相关性淋巴组织淋巴瘤的发生密切相关［1］。目前治疗和控制Hp感染的主要手段是抗生素治疗，在治疗Hp感染的抗生素中以甲硝唑应用最广，随着甲硝唑的广泛应用，其耐药性问题日益突出，已成为治疗失败的主要原因之一［2］。Hp对甲硝唑耐药机制尚未完全明了，目前主要认为对氧不敏感的NADPH硝基还原酶（Rdx A）失活是导致甲硝唑耐药的关键，该酶的编码基因为rdx A基因［3］。有文献报道参与Hp对甲硝唑耐药的硝基还原酶还包括：3种铁氧还蛋白类似物（Fdx B）、NADPH 黄素氧还酶（Frx A）等［4－5］。但在 Hp耐甲硝唑机制的研究中，对fdx B和frx A的报道甚少，本文拟采用PCR扩增rdx A、fdxB和frx A基因，并对这3个基因测序分析，探讨Hp对甲硝唑耐药与rdx A、frx A和fdx B点突变的关系。

1 材料与方法

1.1 菌株来源 采自贵阳医学院附属医院，60例患者因胃部不适行胃镜检查，标本取自其胃窦部或胃体部粘膜，并且C14尿素呼气试验为阳性的情况下，进行Hp的分离培养所得。国际标准测序株Hp26695株购自ATCC。

1.2 主要试剂 E－Test试验条、微需氧袋：法国梅里埃公司；哥伦比亚血琼脂粉：OXOID；DNA提取试剂盒：北京天恩泽基因科技有限公司。

1.3 Hp的分离培养及鉴定 取胃窦部内镜活检组织，接种于幽门螺杆菌选择培养基平板，微需氧37℃培养3～7 d，进行Hp鉴定及培养。

1.4 药敏试验 采用E－Test法检测Hp对甲硝唑的最低抑菌浓度（MIC）。用 Hp标准测序株Hp26695作每批试验的质控标准。以MIC值≥8 μg/m L判定为甲硝唑耐药，MIC值≥32μg/m L判定为高水平甲硝唑耐药［6］。……