师永霞，黄吉城，苏锦坤，李小波，幸芦琴，郑 夔，洪 烨，郭波旋

1例国内罕见的输入性卵形疟的实验室检测＊

师永霞，黄吉城，苏锦坤，李小波，幸芦琴，郑 夔，洪 烨，郭波旋

目的 对1例输入性疑似疟疾患者的血样进行实验室检测。方法 制备疑似疟疾患者血样的血涂片，吉姆萨染色后进行疟原虫的镜检观察。利用实验室自行研制的疟原虫属特异性（通用型）和4种疟原虫种特异性的巢式PCR和实时荧光PCR检测方法，对该血样进行疟疾检测及分型。将PCR扩增片段进行序列测定，并与已知的卵形疟序列进行blast比对分析。结合血样的分子生物学检测结果，重新对镜检结果进行复核。结果 血样初次镜检为疟疾阴性。使用疟原虫巢式PCR通用引物对血样的DNA进行PCR检测，扩增出了预期大小约240bp的条带；巢式PCR分型检测表明，血样仅扩增出预期大小约450bp的卵形疟条带，无对应大小的恶性疟、间日疟和三日疟扩增条带产生。疟原虫通用型和卵形疟特异性的荧光PCR检测结果均为典型的S形阳性曲线，卵形疟扩增片段的熔解温度为72.5℃。序列分析表明，扩增片段长度为434bp，blast比对发现去除引物后的393个碱基与GenBank DQ845247等卵形疟的SSU rRNA对应部分的基因序列同源性为100%。重新对血涂片进行镜检复核，结果在薄血膜中发现了卵形疟的环状滋养体，被寄生的红细胞为椭圆形，边缘呈伞矢状。结论 使用巢式PCR、实时荧光PCR、序列分析和镜检等方法，证实该例输入性的疑似疟疾患者为卵形疟原虫感染。

输入性卵形疟；镜检；……