陈丽丽,黄靓妹,詹红艳,曹亦宾,史 楠,黎 洁,王丹丹

(唐山工人医院 1.神经内科;2.急诊内科,河北 唐山 063000）

脑源性生长因子(BDNF）是神经生长因子家族的一员,研究发现BDNF与癫痫密切相关,组织缺血缺氧后脑内BDNF释放量明显增多,且对癫痫有保护作用。丹参多酚酸盐注射液是国家二类中药新药。自2005年5月获批应用以来,证实它具有抗血小板聚集、抗血栓形成、改善微循环、抗氧化损伤的作用。本课题拟采用免疫组织化学方法观察匹鲁卡品(PILO）所致大鼠脑内BDNF的表达,探讨丹参多酚酸盐干预注射后对大鼠脑内BDNF的表达影响。

1 材料与方法

1.1 材料

健康雄性成年Wistra大鼠15只,体重200-250 g,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。将动物置于20℃、安静的环境中饲养。匹鲁卡品(PILO）,美国SIGMA公司;,兔抗大鼠BDNF多克隆抗体与SABC免疫组化试剂盒,均由武汉博士德公司提供。

1.2 方法

1.2.1 实验动物分组 将大鼠随机分为(1）丹参多酚酸盐干预组5只,用2%戊巴比妥钠0.1 ml/50 g将大鼠麻醉,固定于立体定位仪上,按大鼠解剖图谱取前囟后2.0 mm、左旁开1.0mm,钻开颅骨,校准微量进样器,抽取10 mg/kg,垂直进针至硬脑膜下3.5 mm(左侧脑室）,注射完毕后拔出进样器,撒上青霉素粉预防感染,缝合皮肤后放回饲养笼内;第二天先腹腔注入东莨宕碱1 mg/kg,以拮抗其外周胆碱能反应,半小时后腹腔注射匹鲁卡品(PILO）350 mg/kg。(2）生理盐水干预组5只,用相同的方法侧脑室注入等量生理盐水,第二天腹腔注射PILO350 mg/kg。(3）对照组5只,给大鼠腹腔注射等量的生理盐水。观察上述各组大鼠有无癫痫发作。……