陈向来，唐燕华，杨崛圣

（南昌大学第二附属医院胸外科，南昌330006）

缺血预处理（ischemic preconditioning，IP）是细胞自我保护机制的启动过程，1986年C.E.Murry等［1］提出缺血预处理可以减轻心肌缺血再灌注损伤、减少心律失常，但其机理仍未完全阐明。临床上多数心脏病人在术前已有不同程度的心肌肥厚等病变，在经历体外循环直视手术的急性缺血后比正常心肌更容易出现各种心律失常。本实验通过结扎肥厚心肌兔冠状动脉复制心肌急性缺血模型，对其中部分进行缺血预处理，观察其对缺血心肌的保护作用，并从缝隙连接蛋白（Cx43）角度进一步探讨心律失常的发生机制及IP对减少心律失常的作用。

1 材料和方法

1.1 材料

1）动物：新西兰大耳白兔14只，体质量2.2～2.5kg，由南昌大学实验动物中心提供。2）试剂：苏木素伊红液（南昌大学病理教研室提供），抗Cx43多克隆抗体（博士德公司），SABC（荧光CY3）试剂盒（博士德公司，内容：正常山羊血清5mL，生物素化二抗0.5mL，S ABC－cy3 0.5mL），PBS磷酸缓冲液，纯丙酮、二甲苯、缓冲甘油、无水酒精、中性树胶。3）设备及器材：H2S－D恒温水溶箱（哈尔滨仪器仪表公司），BL－410生物机能实验系统（成都泰盟），实验动物呼吸机（浙江大学医学仪器厂），石蜡及冰冻切片机（英国珊顿），激光扫描共聚焦显微镜（包括荧光显微镜彩色成像输入仪和Image－Analysis图像分析系统）。

1.2 实验方法

1.2.1 模型制备

参照A.F.Cutilleta等［2］的方法建立兔左心室肥厚模型，6周后将左心室肥厚的兔参照汪谦［3］的方法建立兔肥厚心肌急性缺血模型。

1.2.2 实验分组

14只新西兰大耳白兔均制模成功，将其按随机数字表法分为2组，每组7只。……