CAV1基因沉默增强MCF-7多细胞球对多柔比星的敏感性

2011-08-14顾栋桦平金良董吉顺朱荣陈琦

中国癌症杂志 2011年9期

关键词：耐药

顾栋桦平金良董吉顺朱荣陈琦

1. 浙江省湖州市中心医院病理科，浙江湖州 313000；2. 复旦大学上海医学院病理学系，上海 200032

肿瘤化疗耐药是导致肿瘤治疗失败的重要原因，因此深入了解肿瘤耐药的机制是提高肿瘤临床化疗疗效的重要基础。细胞质膜微囊蛋白-1 (caveolin-1，CAV1)是细胞质膜微囊的主要功能蛋白，能与细胞膜上许多生物活性蛋白结合并调节细胞的生命活动，也与肿瘤细胞的耐药相关［1-2］。本研究以体外三维培养的MCF-7多细胞球作为模型，运用RNA干扰技术沉默CAV1基因的表达，观察MCF-7多细胞球对多柔比星耐药性，并对其机制作初步的探讨。

1 材料与方法

1.1 乳腺癌MCF-7细胞单层培养

乳腺癌MCF-7细胞株购于中国科学院细胞资源中心，细胞在37 ℃、CO2体积分数为5%、饱和湿度的条件下用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基(Gibco公司，美国)培养。

1.2 MCF-7多细胞球模型的建立

按细胞三维培养方法(liquid overlay technique)获得MCF-7多细胞球：首先用无血清培养液RPMI-1640溶解稀释琼脂糖至1.5%浓度，灭菌后在细胞培养皿上铺一浅层，冷却凝固后用于细胞接种；单层贴壁培养的MCF-7细胞处于生长对数期时，用胰酶消化后制成单细胞悬液，调整细胞密度至5×105/mL接种于上述培养皿中，轻轻震荡后置于37 ℃、CO2体积分数为5%的培养箱中，每24 h半量换液，相差显微镜观察多细胞球生长情况，培养3 d后形成大小较一致的MCS，直径约100～150 μm，用于实验。