应荣彪 冯俊 李建军 瞿海江 姚俊

台州市肿瘤医院，复旦大学附属肿瘤医院台州分院肿瘤外科，浙江 台州 317502

微管是细胞骨架的主要组成部分, 由α、β-微管蛋白异二聚体组成［1］，是紫杉烷类抗肿瘤的作用靶点，微管蛋白可以通过对这一靶点的调节影响紫杉醇的抗肿瘤活性。微管在细胞分裂中具有极其重要的作用, 现已成为抗肿瘤药物研究的重要靶点之一。目前，紫杉烷类是治疗乳腺癌最重要的化疗药物之一，通过促进微管蛋白聚合，最终导致乳腺肿瘤细胞凋亡。然而紫杉烷类的耐药性常常限制了治疗效果，使病情难以长期控制。故揭示α、β-微管蛋白在乳腺癌变过程中表达水平的变化显得尤为重要，为通过改变其表达水平改善乳腺癌紫杉烷类化疗耐药性提供理论基础。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选取台州市肿瘤医院2004年8月—2009年12月间具有完整的临床病理资料和存档的石蜡包埋组织标本，按世界卫生组织(WHO)乳腺病理组织学分类(2003年新版)标准［2］，经双盲病理诊断，乳腺非典型增生(atypical ductal hyperplasia，ADH)30例，从同期病例中随机抽样，导管内癌(ductal carcinoma in situ，DCIS)30例和浸润性癌(invasive ductal carcinoma，IDC)30例，另从乳腺纤维腺瘤行区段切除术的标本中取瘤旁正常乳腺组织30例。

1.2 试剂与仪器

鼠抗人α-tubulin单克隆抗体IgG(ZM-0438)，鼠抗人β-tubulin单克隆抗体IgG(sc-58880)为Santa Cruz公司产品；超敏即用型鼠二步法(非生物素)免疫组织化学检测试剂盒(PV-9002)为美国GBI公司产品；使用全自动免疫组化机(美国Biogenex AS60302)进行免疫组化实验。

免疫组织化学检测：按照免疫组织化学二步法检测试剂盒操作说明进行(一抗稀释度：α-微管蛋白1∶100，β-微管蛋白1∶100)。……