巴晓红， 潘凤英

研究发现，大鼠持续吸入纯氧气24h可以诱导明显的脑缺血耐受称为OIP［1］，目前在动物模型上研究证明脑缺血再灌注后有大量神经细胞凋亡，凋亡是脑缺血再灌注损伤后神经死亡的重要方式［2］。目前已知的凋亡途径有:死亡受体(death receptor 5，DR)介导的凋亡通路、线粒体/细胞色素c介导的凋亡通路、内质网应激(endoplasmic reticulum stress，ERS)途径。ERS是引起凋亡的重要机制之一，目前机制仍未完全阐明。目前OIP对脑缺血再灌注损伤的保护作用在凋亡调控基因Bcl-2、Bax、原癌基因cfos、星形胶质细胞的激活、SOD的活性增强等方面已有报道，但OIP是否对大鼠局灶脑缺血再灌注模型ERS及其诱导的细胞凋亡影响的研究未见报道。CHOP/GADD153是ERS的两个经典标志物之一［3］。本实验通过观察OIP对大鼠脑缺血再灌注损伤后ERS途径导致的细胞凋亡及经典标志物CHOP/GADD153的表达，全面动态阐明OIP对局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用。

1 材料与方法

1.1 材料

(1)动物:狼褰嗉禨D大鼠180只，雌雄各半，体重250～300g，由辽宁医学院实验动物中心提供。饲养条件25℃，相对湿度为60%，光照时间12h/d，清洁饮水，标准饲养。(2)仪器和试剂:麻醉气体分析仪，兔抗大鼠GADDl53免疫组化试剂盒(北京博奥森生物工程公司)，TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(美国promega公司)，CIAS-1000型细胞图像分析仪，ECL试剂(上海普飞公司)。

1.2 方法

1.2.1 动物分组 将健康SD大鼠随机分为模型组、假手术组和OIP组。每组按再灌注时间点(从线栓拔出时算起)不同再分为3h组、12h组、24h组、48h组、72h组，每组随机选12只大鼠，到相应时间点立即处死。模型组和OIP组大鼠均用线栓法造成右侧MCAO模型，2h后开放灌注。……