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RP-HPLC法测定人血清中多索茶碱的浓度

2011-08-10王淑梅张志清杨秀岭王楠张君河北医科大学第二医院石家庄市050000河北医科大学药学院石家庄市05007

中国药房 2011年34期
关键词:血清

王淑梅,张志清,杨秀岭,王楠,张君(.河北医科大学第二医院,石家庄市050000;.河北医科大学药学院,石家庄市 05007)

多索茶碱(Doxofylline)为新型的非腺苷阻滞性支气管扩张药,具有平喘、抗炎和镇咳作用。其疗效较茶碱强,耐受性好,且不良反应较茶碱少,在治疗支气管痉挛方面可能成为茶碱替代品[1]。文献[2]报道,多索茶碱对血管有独特的耐受性,对中枢神经和胃肠道等无影响;对患有严重肝功能损害或伴随喹诺酮类药物治疗的患者应进行血药浓度监测。反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定多索茶碱血药浓度已有文献报道[3,4],样品处理方法主要有沉淀蛋白法和提取法。本试验采用RPHPLC法对人血清中多索茶碱的浓度进行测定,并探索和改进方法,现报道如下。

1 材料

1.1 仪器

高效液相色谱仪,包括515泵、486检测器、Rheodyne 7725i进样阀、Empower Pro工作站(美国Waters公司);GL-20G-Ⅱ离心机(上海安亭科学仪器厂);GL-88B涡旋混合器(江苏海门麒麟医用仪器厂);CPA225D电子天平(德国Sartorius公司)。

1.2 试药

多索茶碱对照品(中国药品生物制品检定所,批号:100625-200301);内标:咖啡因对照品(中国药品生物制品检定所,批号:171215-200608);甲醇为色谱纯,异丙醇和三氯甲烷为分析纯。空白血清由健康受试者提供。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-水(30∶70);流速:1.0 mL·min-1;检测波长:272 nm;进样量:20 μL;柱温:30 ℃。

2.2 溶液的制备

2.2.1 多索茶碱对照品贮备液:准确称取多索茶碱对照品50.80 mg,置于50 mL容量瓶中,加甲醇溶液溶解、定容,得质量浓度为1 016 μg·mL-1的多索茶碱对照品贮备液,于4℃冰箱中保存备用。

2.2.2 内标溶液:准确称取咖啡因对照品51.20 mg,置于50 mL容量瓶中,加甲醇溶液溶解、定容,精密吸取1.5 mL该溶液置于50 mL容量瓶中,以甲醇定容,得质量浓度为30.72 μg·mL-1的内标溶液,于4℃冰箱中保存备用。……

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