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芦根溶解尿结石的体外实验研究

2011-08-09杨淑玲杨金元罗南洪卢爱军

实用临床医学 2011年7期
关键词:芦根柠檬酸提取液

杨淑玲,杨金元,罗南洪,庹 浔,卢爱军,郭 惠,林 娜

(1.南昌大学理学院化学中心,南昌330031;2.江西省职业病医院检验科,南昌330006)

芦根(别名:芦茅根、苇根、芦柴根、芦菇根、顺江龙、水蓈蔃、芦通、苇子根、芦芽根、甜梗子等)为禾本科植物芦苇(Phragmites communis Trin)的新鲜或干燥根茎[1-2]。《中药学》指出:芦根其功效为清热泻火、止呕利尿、能溶解结石[1]。临床中药辞典也指出:芦根具有清热生津、清泻肺热、清胃止呕、利尿通淋之功效[2],被选入许多溶石的方剂,如:芦根排石汤[3]等。

尿石症是我国常见的泌尿外科疾病之一。近年来,尿石症的发病率不断升高[4]。尿结石可分为:草酸钙、磷酸钙、磷酸镁铵、尿酸结石、胱氨酸结石及其他结石等6类。一般以复合形式存在,草酸钙与磷酸钙的混合物占80~84%,磷酸钙与磷酸镁铵的混合物占6~9%,尿酸结石占6~10%,胱氨酸结石占1~2%,其他特殊结石占1%以下[5]。我国是3大结石高发区之一,泌尿系统结石发病率为1%~5%,南方地区高达5%~10%,每年新发病率150~200/10万人,且有上升趋势[4,6-7]。

结石病既影响身体健康,又影响工作和劳动能力。寻找高效溶石的药物,是许多科研工作者不断探索的课题。本研究探索了芦根在不同时间、不同湿度及维生素C和柠檬酸存在下的溶解尿结石的作用,旨在为开发芦根药用资源,提高芦根的药用价值,提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 主要仪器与药物

YJ501型超级恒温器(上海跃进医疗器械厂),美国VARIAN GTA 120原子吸收分光光谱仪。芦根由南昌三点堂药店提供,尿结石样品由南昌大学第二附属医院泌尿外科提供。分析纯CaCO3(广东西陇试剂厂),分析纯柠檬酸、维生素C(国药集团药业股份有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 芦根水提取液的制备

芦根500 g加蒸馏水5 000 m L煮沸1 h,过滤;残渣加蒸馏水4 000 m L煎煮30 min,过滤;合并过滤液。冰箱冷藏24 h,取上清液。下层液体过滤,合并上清液和过滤液,得芦根水提取液2.5 L,(含芦根生药200 g·L-1),备用。

1.2.2 芦根水提取液在不同时间溶解尿结石的作用

取0.5 L试剂瓶5只(编号:0、1、2、3、4),用移液管吸取芦根水提取液100 m L(含芦根生药20 g),加入到各试剂瓶中,每瓶中同时放入尿结石样品3 g(0号不放尿结石样品),一直搅拌,100 r·min-1。除0号试剂瓶外,分别在0、1、2、3、4 h后,滤去尿结石样品,得到试样 A0.A1.A2.A3.A4.A5,待测Ca2+浓度。

1.2.3 维生素C对芦根水提取液溶石作用的影响

取0.5 L试剂瓶5只(编号:0、1、2、3、4),用移液管分别加入芦根水提取液100 m L,每瓶中分别放入尿结石样品3 g(0号不放进尿结石样品)和维生素C 0.5 g,置恒温水浴上一直搅拌,100 r·min-1。除0号外,分别在0、1、2、3、4 h后滤去尿结石样品,得到试样D0、D1、D2、D3、D4,待测Ca2+浓度。

1.2.4 柠檬酸对芦根水提取液溶石作用的影响

取0.5 L试剂瓶5只(编号:0、1、2、3、4),用移液管分别加入芦根水提取液100 m L,每瓶中分别放入尿结石样品3 g(0号不放进尿结石样品)和柠檬酸0.5 g,一直搅拌,100 r·min-1。除0号外,分别在0、1、2、3、4 h后滤去尿结石样品,得到试样E0、E1、E2、E3、E4,待测Ca2+浓度。

1.2.5 芦根水提取液在不同温度下的溶石作用

取0.5 L试剂瓶5只(编号:0、1、2、3、4),分别用移液管加入芦根水提取液100 m L,每瓶中同时放入尿结石样品3 g(0号不放进尿结石样品),在恒温水浴上一直搅拌,100 r·min-1。温度(室温)分别控制在19、29、39、49、59℃,除0号外,分别在0、1、2、3、4 h后滤去尿结石样品,得到试样 B0、B1、B2、B3、B4,待测Ca2+浓度。

1.2.6 Ca2+浓度的测定

1.2.6.1 Ca2+标准溶液的制备

在110℃干燥至恒重的基准物质CaCO3准确称取0.500 0 g,置于250 m L烧杯中,盖以表面皿,加水润湿,再从烧杯嘴边逐滴加入数毫升HCl至完全溶解,加热至沸,用蒸馏水把可能溅到表面皿上的溶液洗入杯中,待冷却后移入250 m L容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。相当于CaCO32 g·L-1。

1.2.6.2 钙标准曲线的制备

取标准钙溶液(2 g·L-1)30、40、50、60、70、80 m L,进行原子吸收光谱测定,制得钙标准曲线。

1.2.6.3 各组Ca2+浓度的测定

使用美国VARIAN GTA 120原子吸收分光光谱仪测定Ca2+浓度。工作波长:422.7 nm;工作电流:3 m A;狭缝:0.5 nm;空气:11.00 L·min-1;乙炔:1.5 L·min-1。平行条件下测定3次,取平均值。对各组(不同时间组、维生素C组、柠檬酸组、不同温度组)的试样分别进行Ca2+浓度的测定。

2 结果

2.1 各组中芦根水提取液溶解尿结石的量(按Ca2+ mg·L-1计 )与时间的关系

芦根水提取液中含 Ca2+量平均为37.06 mg·L-1。不同时间条件下芦根水提取液溶解尿结石时,3 h达到最高峰,溶解结石(按Ca2+mg·L-1计)为5.66 mg·L-1,3 h后几乎无变化。见表1。

不同温度下芦根水提取液溶解尿结石时,随着温度的升高,溶解量亦无明显变化。见表2。

在维生素C存在条件下,芦根水提取液溶解尿结石的量(按Ca2+mg·L-1计)为7.37 mg·L-1;在柠檬酸存在条件下,芦根水提取液溶解尿结石的量(按Ca2+mg·L-1计)为5.81 mg·L-1。

说明维生素C和柠檬酸对芦根水提取液溶解尿结石都有助溶作用,但维生素C的助溶作用更强。

表1 各组试样中Ca2+浓度的测定结果ρ/(mg·L-1)

表2 不同温度组Ca2+浓度的测定结果ρ/(mg·L-1)

2.2 各组中芦根水提取液溶解尿结石的Ca2+浓度变化曲线

各组中芦根水提液溶解尿结石的Ca2+浓度变化曲线见图1。

图1 各组C变化曲线

3 讨论

根据医学统计及流行病学调查发现,尿结石病患者比二十世纪初多十倍[7]。人类一直在努力改进和提高治疗结石的方法和技术,但因其复发率很高,常伴有并发感染,给患者带来了极大的痛苦,严重时甚至危及患者的生命[8]。

尿结石属中医“石淋”范畴,多因感受外界六淫之湿邪或秽浊之气,移热下焦或嗜食肥甘厚味,酿生湿热,蕴结于肾及膀胱,致下焦湿热,尿液煎熬日久,尿中杂质结为结石,结石内阻,气机不畅,以致气滞血瘀。故石淋以下焦湿热瘀阻为基本病机。早期多为实证,治以清热利湿、通淋排石、理气通降行瘀[9]。芦根具有溶解尿结石的功能,有利尿通淋之功效。

芦根中含有多种化学成分,如:阿魏酸、多糖、甾体化合物、萜类化合物、脂肪酸等[10],其中萜类化合物可能有溶解泌尿结石的作用。在治疗泌尿结石时,除了要溶解结石外,还要保护肾组织,所以,芦根溶解泌尿结石,只是治疗结石的一个方面,还必须用保护肾脏药物,疗效才更佳。根据结石成因的基因学说,因目前对草酸钙结石有关的基因研究还不够深入,现在还难以从这方面有效地预防及防止复发。

本研究显示:在不同时间条件下,芦根水提取液溶解尿结石时,3 h达到最高峰,溶解尿结石(Ca2+计)5.66 mg·L-1,3 h后几乎无变化;不同温度下芦根水提取液溶解尿结石时,随着温度的升高,溶解量无明显变化。结果还表明,维生素C和柠檬酸对芦根水提取液溶解尿结石都有助溶作用,但维生素C的助溶作用更强。

[1] 成都中医学院.中药学[M].上海:上海科技出版社,1978:59.

[2] 郭国华.临床中药词典[M].2版.长沙:湖南科技出版社,2008:281.

[3] 邱火新.芦根排石汤治疗肾结石180例小结[J].新中医,1994,26(7):28-29.

[4] 何家扬,张燕宾,马凤宁.尿结石住院患者1 100例分析[J].现代泌尿外科杂志,2005,10(3):158-159.

[5] 齐琳,齐范.泌尿外科学住院医师手册[M].北京:北京科技出版社,2008:225.

[6] 孙则禹.泌尿外科疾病诊疗知识[M].南京:东南大学出版社,2007:62-65.

[7] 欧阳健明.草酸钙结石研究中的化学基础[J].化学通报,2002,65(5):326-333.

[8] 曹秋生,胡燕霞,黄士杰,等.草酸钙尿结石患者成因分析[J].中国现代医学杂志,2007,17(11):1359-1364.

[9] 常向明.五金汤合推动结石的运动排泌尿结石[J].浙江中医药大学学报,2007,31(1):88-89.

[10] 邵荣,郭海滨,许伟,等.芦苇中活性物质研究进展[J].中国生化药物杂志,2011,32(2):167-168.

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