付 俊,缪时英

中国医学科学院北京协和医学院 基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京 100005

哺乳动物的精子发生是一个复杂的细胞分化过程,其依赖于一个真正的干细胞群体,它们具有自我更新和产生后代分化为精子的能力[1]。精子发生按其顺序,大致包括3个阶段:第1阶段是精原干细胞经有丝分裂、分化发育形成初级精母细胞;第2阶段是初级精母细胞经第1次减数分裂形成次级精母细胞,再经第2次减数分裂形成单倍体圆形精子细胞;第3阶段是精子细胞变态,包括顶体发生、核浓缩拉长、尾形成,多余胞质脱落,最终形成具有头、颈、尾几个结构的高度分化的精子[2-3]。

根据精子的发育阶段和形态,一般将精子发生分为精原细胞、精母细胞、圆形精子细胞和长形精子细胞等几个阶段。很多涉及到精子发生的蛋白质在各个阶段进行精细的调节[4-6]。在研究这些蛋白质的功能前,先检测这些蛋白质在精子发生过程中的定位以及随着精子发生其定位是否有所变化,对于分析这些蛋白质在精子发生过程中的功能具有重要的作用。以往的研究者常采用睾丸切片免疫组织化学或者免疫荧光的方法,来检测某些蛋白质在精子发生过程中的定位[7-8],但睾丸中各种类型、各个阶段的细胞有序而又紧密地排列在一起,欲观察蛋白质在精子发生的某个阶段中较为精细的定位比较困难。本研究拟建立一种简单可行的研究精子发生过程中蛋白质定位的方法,以期为进一步研究其功能打下良好的基础。……