韩明，袁芳，董丽萍，师忠芳，袁辉，杨少华

神经胶质细胞瘤(简称“胶质瘤”)是中枢神经系统最常见而又最难治的肿瘤，手术后的有效化疗是目前治疗恶性胶质瘤、延长患者生命的必要手段之一[1]。但是，由于胶质瘤化疗耐药现象十分常见，化疗效果并不理想，因此提高胶质瘤细胞对化疗药物的敏感性是胶质瘤化疗亟须解决的重要问题。BT325胶质瘤细胞是我所80年代由1例人脑多形性胶质母细胞瘤(WHOⅣ级)细胞培养建立的细胞系[2]，为国内学者研究人脑胶质瘤常用的细胞系之一[3-4]。但是，目前缺乏该细胞系对临床常用抗肿瘤药物敏感谱的研究，本实验选用简便、准确性高的cell-countykit-8(CCK-8)法，检测BT325胶质瘤细胞对顺铂(cisplatin,DDP)、替尼泊甙(teniposide,VM26)、尼莫斯汀(nimustine,ACNU)、替莫唑胺(temozolomide,TMZ)及长春新碱(vincristine,VCR)5种临床常用抗肿瘤药物的敏感性。

1 材料与方法

1.1 材料 人脑多形性胶质瘤细胞系BT325：北京市神经外科研究所储存。试剂与仪器：DMEM：GIBCO公司；胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)：北京元亨圣马生物技术研究所；培养板：Costar公司；DDP：齐鲁制药有限公司；ACNU：日本三共株式会社；VM26：百时美施贵宝；TMZ：江苏天士力帝益药业有限公司；VCR：广州明兴制药有限公司；CCK-8试剂盒：日本同仁化学公司；胶质纤维酸性蛋白GFAP试剂盒：北京中杉金桥生物技术有限公司；Sunrise酶标仪：瑞士TECAN公司。

1.2 细胞培养 取液氮冻存的BT325胶质瘤细胞，40℃～42℃水温迅速融化后1000 r/min离心10 min，去上清，加入含20%FBS的DMEM培养基，吹打分散为细胞悬夜，接种于培养瓶中，37℃,5%CO2培养箱中孵育。

1.3 细胞生长曲线测定 取已铺满BT325细胞的培养瓶，用终浓度为0.25%的胰蛋白酶和0.02%乙二胺四乙酸(EDTA)消化后吹打分散为单细胞，接种于24孔培养板，接种密度为5×104个/ml。……