郭 瑶，汪 平，董沁芳，程菊会，徐 辉，丁先锋，郭江峰，姜永厚*

(1.浙江理工大学生命科学学院，浙江杭州310018；2.浙江省动物疫病预防控制中心，浙江杭州310020)

GUO Yao1,WANG Ping1,DONG Qin-fang1,CHENG Ju-hui1,XU Hui2,DING Xian-feng1,GUO Jiang-feng1,JIANG Yong-hou1*

(1.College of Life Sciences,Zhejiang Sci-Tech University,Hangzhou 310018,China;2.Centre of Animal Diesase Control of Zhejiang Province,Hangzhou 310020,China)

猪圆环病毒 2型(Porcine circovirus type 2，PCV2)在临床上易与其它病原混合感染引起断奶仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)、猪皮炎与肾病综合征(PDNS)等疾病[1]。PCV在世界各国猪群中广泛存在，临床上易与其它病原混合感染。猪细小病毒(Porcine parvovirus，PPV)能够引起母猪繁殖障碍，导致的临床症状为母猪流产、死胎和木乃伊胎等[2]。猪伪狂犬病(Pseudorabies，PR)是由PR病毒(PRV)引起的传染性疾病，临床症状为母猪流产、产死胎、弱仔及木乃伊胎等[3]。该病在猪群中具有死亡率高、传播速度快、流行范围广等特点[4]。上述3种猪病毒引起的疾病症状相似并且常呈混合感染，因此建立快速有效地检测手段，对制定切实可行的疫病防制措施具有重要意义。

连接酶检测反应(LDR)是利用耐热DNA连接酶的特异性，在探针与目的DNA互补配对后，连接酶通过催化磷酸二酯键将相邻的两个探针连接，当探针的接头处存在碱基错配时，连接反应便不能够进行[5]。LDR技术具有特异性高、通用性好、适用范围广等特点，通过整合其它技术，在生物分子检测中取得了更大进展[6]。基因芯片技术是伴随着人类基因组计划的实施而发展起来的前沿生物技术，基本原理是利用反向固相杂交技术，将标记的样品分子与微点阵上的核酸探针杂交，实现多至数万个分子间的杂交反应，但灵敏度不高[7]。许多方法将多重PCR与芯片杂交结合起来提高检测的灵敏度，但对引物设计要求较高，限制了检测通量[8]。……