短期血糖变化对糖尿病大鼠内脏脂肪素表达的影响
2011-08-02玲阳
廖 鑫 黄 琦 高 琳 陈 玲阳 琰 吴 芹
(遵义医学院附属医院内分泌科,贵州 遵义 563003)
研究表明内脏脂肪素(visfatin)具有类似胰岛素的降血糖作用〔1〕;visfatin和胰岛素对葡萄糖刺激的分泌模式不同,糖负荷后血浆visfatin水平不似胰岛素那样随血糖水平升高而升高,但其确切的生理功能还不十分清楚。本文通过建立糖尿病(DM)大鼠模型,用胰岛素不同程度地控制(DM)大鼠的血糖,评价血糖变化对大鼠血清visfatin水平和内脏脂肪visfatin mRNA的影响。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 雄性SD大鼠,3~4月龄,体重160~180 g。
1.1.2 主要试剂及药品 链脲佐菌素(STZ)为美国Sigma公司产品;大鼠内脏visfatin ELISA试剂盒购自美国ADL公司;游离脂肪酸(FFA)试剂盒购自英国RANDOX公司;Trizol Reagent、焦碳酸二乙酯(DEPC)、逆转录试剂盒、SYBR®GREEN PCR Master Mix均购自宝生物工程(大连)有限公司。引物由宝生物工程(大连)有限公司设计合成。注射用短效胰岛素注射液及精蛋白锌胰岛素购自江苏万邦生化医药公司。
1.1.3 普通饲料成分 80%玉米粉,面粉15%,黄豆粉5%。高脂高糖饲料:普通饲料65%+炼猪油20%+蔗糖10%+蛋黄5%。
1.2 方法
1.2.1 模型制备及分组 雄性SD大鼠适应性喂养1 w后,随机分为两组:空白对照组(n=19),普通饲料喂养,等体积柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液腹腔注射;DM组(n=43),高糖高脂饲料喂养6 w后,小剂量STZ(40 mg/kg)一次性腹腔注射。于注射后3 d禁食12 h,测定空腹血糖(FPG),以FPG≥16.7 mmol/L作为DM大鼠成模标准〔1〕,将其分为3组:DM血糖严格控制组(n=14):每日皮下注射一次精蛋白锌胰岛素,控制FPG<10 mmol/L;DM血糖未严格控制组(n=10):每日皮下注射一次精蛋白锌胰岛素,控制FPG在10~14 mmol/L;DM血糖未控制组(n=19):不控制血糖,FPG>16.7 mmol/L。
1.2.2 标本采集 四组大鼠待血糖稳定1 w后禁食12 h,分别取尾静脉血,离心分离血清测FPG、空腹胰岛素(FINS)、FFA、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)。……
