仇 炜 雷宇华 张 宁 李冬军 苏 明 沈永青

(河北医科大学附属第四医院泌尿外科，河北 石家庄 050011)

山柰酚属黄酮类化合物，该化合物为姜科植物山柰根茎的提取物。以往研究证实，山柰酚有多种生物学功能，如抑制卵巢癌血管形成〔1〕、抗氧化损伤〔2〕等。然而山柰酚对人前列腺癌细胞迁移的作用及其作用机制尚不清楚。本研究通过检测山柰酚对体外培养的人前列腺癌非激素依赖型PC-3细胞株迁移的影响，初步探讨该作用的机制，为前列腺癌的药物治疗及山柰酚的临床应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 山柰酚 将山柰酚(Sigma)粉末充分溶解于DMSO中，配制成浓度为80 mmol/L的储液，分装后于－20℃下避光保存。

1.2 细胞培养及分组 将人前列腺癌PC-3细胞株(北京协和细胞资源中心)用含 FBS(体积分数为10%)的RPMI-1640培养基培养，经传代后进行实验。本研究分为实验组和对照组，实验组细胞用山柰酚处理，溶剂对照组细胞用终浓度为0.1%(体积分数)的DMSO孵育。各组细胞在处理前换用含FBS(体积分数为1%)的RPMI-1640培养基24 h。

1.3 MTT分析 将处于对数生长期的PC-3细胞接种于96孔板，每孔100 μl(约1×104个细胞)，待细胞贴壁后分别加入不同浓度的山柰酚(10、20、40、80 μmol/L)，溶剂对照组加入体积分数为0.1%的DMSO，空白对照组不做任何处理，以上各组分别孵育12、24及48 h。之后每孔换用新的培养液并加入MTT溶液(5 g/L)20 μl于37℃下孵育3 h，小心弃去培养液后每孔各加DMSO 150 μl，混匀并在酶标仪上于570 nm处检测吸光度值(OD值)。以上各组设6个复孔。

1.4 伤口愈合实验 将PC-3细胞接种于玻片上，待细胞生长至100%汇合后用无菌Tip头在玻片上划痕，用PBS冲洗被刮下的悬浮细胞。……