赵雯红 陈志强 张江华 孙玉凤 王月华 裴国超

(河北医科大学中医院肾内科，河北 石家庄 050011)

糖尿病肾病(DN)即糖尿病肾小球硬化症，其主要病理学特征为:早期肾小球肥大，肾小球基底膜增厚，肾小球系膜区扩张;晚期细胞外基质(ECM)进行性积聚，导致肾小球、肾小管间质的纤维化、硬化。这种病理变化的组织学基础即是ECM积聚。Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)是肾小球ECM的主要组成成分，研究表明Col-Ⅳ表达增加在糖尿病肾脏纤维化的发生发展中具有重要作用〔1〕。而结缔组织生长因子(CTGF)作为CCN家族成员之一，可促进Col-Ⅳ等ECM的过度表达〔2〕。益气养阴消癥通络法为我们治疗DN的基本法，临床疗效较好〔3〕，本实验旨在研究此复方对CTGF/Col-Ⅳ表达的干预作用，以探讨其抗糖尿病肾脏纤维化作用的可能机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药物及试剂 链脲佐菌素(STZ，美国Sigma公司，S01303)。益气养阴消癥通络中药(黄芪、熟地、茯苓、地龙、水蛭、鳖甲、积雪草、丹参、大黄、砂仁)生药由河北医科大学附属中医院提供，中药汤剂由本实验室制备，浓缩至含生药1 g/ml，分装灭菌，4℃保存备用。厄贝沙坦片(安博维)，150 mg/片，杭州赛诺菲圣德拉堡民生制药有限公司生产，批号0809155。Trizol试剂(上海贝博生物)。反转录 cDNA试剂盒、Taq酶、dNTP(Fermentas公司)。大鼠Col-Ⅳ引物(上海捷瑞生物工程有限公司)。CTGF抗体及 β-actin抗体(美国，Santa Cruz公司)。DAB底物显色试剂盒(北京，天根公司)。

1.1.2 动物及模型制备 SD大鼠110只，雄性，SPF级，体重(250±20)g，由河北医科大学实验动物中心提供，动物合格证编号:905042。大鼠适应性饲养1 w后，分别测定血糖、尿蛋白阴性后行左肾摘除术。2 w后除肾切组外，剩余大鼠一次性腹腔注射 STZ(40 mg·kg－1·d－1)，72 h 后连续三次测血糖均≥16.7 mmol/L为糖尿病大鼠。……