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UTS2-T21M基因多态性与甘肃不同性别人群原发性高血压的关系

2011-08-02张冬蕾兰州大学校医院甘肃兰州730000

中国老年学杂志 2011年20期
关键词:高血压

张冬蕾 伊 琳 (兰州大学校医院,甘肃 兰州 730000)

原发性高血压(EH)是临床常见病,高发病,是导致心脑血管疾病死亡的最主要的危险因素。同时EH的发病存在地域,种族,民族及性别的差异。本文通过研究EH患者UTS2-T21M基因多态性,探讨其在甘肃不同性别人群中的分布特点。

1 资料与方法

1.1 临床资料 (1)病例组:共计318例,男性174例,女性144例,高血压组平均年龄(51±14)岁,来源于甘肃省人民医院,临夏回族自治州医院及东乡县医院住院患者,EH诊断参照1999年高血压防治指南规定的诊断标准,即收缩压≥18.7 kPa和(或)舒张压≥12.0 kPa。排除继发性高血压,心脏病和肾脏病。所有高血压患者在采样前未进行治疗。(2)对照组:共计233例,男性134例,女性99例。平均年龄(51±13)岁,来源于甘肃省人民医院,临夏回族自治州医院及东乡县医院体检人群,家族一级亲属无糖尿病史,排除糖尿病及其他心血管系统疾病。

1.2 方法 ①用全自动生化仪检测血总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白(HDL),低密度脂蛋白(LDL)。②用酚-氯仿法提取基因组DNA。UTS2基因T21M多态性扩增;上游引物 F:5'-GGAAACCAACGTATTTCATC-3',下游引物 R:5'-GCAAAAGAGGCAACTTACAGC-3'。(SBS Genetech Co.,Ltd 合成)。PCR扩增条件:94℃预变性5 min,行10个循环的变性(94℃,1 min)、复性(65℃,1 min) 和延伸 (72℃,1 min);再接15 个周期变性(94℃,1 min)、复性(60℃,1 min)和延伸(72℃,1 min);最后20个循环的变性 (94℃,1 min)、复性(58℃,1 min)和延伸 (72℃,1 min);72℃延伸10 min。PCR产物经经2%琼脂糖电泳确定有一条113 bp,28 bp带后,将PCR产物用限制酶 Hsp92Ⅱ(TaKaRa Biotechnology Co.,Ltd);2.5U 37℃水浴酶切8 h,21M等位基因含Hsp92Ⅱ限制位点,酶切后产生61 bp和52 bp,28 bp三条带;21T等位基因不能被Hsp92Ⅱ消化,只有113 bp,28 bp两条带。

PCR产物用4.0%琼脂糖凝胶电泳,EB染色分析,经凝胶成像系统判断基因型。含有113 bp,28 bp条带为TT纯合子,含有61 bp,52 bp,28 bp 为 MM 纯合子,含有 113 bp,61 bp,52 bp,28 bp为TM杂合子。……

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