N-乙酰半胱氨酸对成年大鼠高氧肺损伤氧化应激机制的影响
2011-08-01刘庆辉俞森洋解放军总医院南楼呼吸科北京100853
刘庆辉,安 莉,石 敏,刘 岩,俞森洋 (解放军总医院南楼呼吸科,北京 100853)
急性缺氧性呼吸衰竭常需高浓度氧疗,但高浓度氧疗在改善机体供氧的同时也会引起肺结构和功能的异常,即高氧肺损伤[1]。高氧暴露可直接刺激活性氧种类(reactive oxygen species, ROS)的生成并导致细胞活性的改变,造成肺泡上皮细胞、毛细血管内皮细胞结构和功能损害,从而导致严重的肺损伤,可见氧化应激反应是高氧肺损伤重要机制之一[2]。目前对新生或幼年动物的高氧肺损伤研究较多,而对成年动物的相关研究较为少见[3]。本研究探讨了成年大鼠高氧肺损伤发生的氧化应激机制,并观察了临床常用药物N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)预处理的影响,为探索防治高氧肺损伤的药物提供一定的依据。
1 材料与方法
1.1 动物
成年健康雄性清洁级SD大鼠48只(军事医学科学院动物实验中心提供),体重(302.2±12.8) g。
1.2 方法
1.2.1 实验设计 48只大鼠随机分为6组,每组8只。5组置入动物实验氧舱(中国烟台东科高压氧设备有限公司)中吸入100%浓度氧气,吸氧时间为24 h、48 h、72 h、96 h、96 h,作为24 h、48 h、72 h、96 h组和NAC干预组,并分别于0 h、24 h、48 h、72 h腹腔内注射NAC(200 mg·kg-1)预处理。还有1组吸入空气0 h作为0 h组。
1.2.2 标本收集 到达实验终点后,将大鼠移出氧舱,分离右侧颈总动脉并抽取动脉血。取出完整肺脏,称取全肺湿重。取右肺组织一小块用4%多聚甲醛溶液固定,剩余右肺组织立即放入冻存管,并置于液氮生物容器保存。肺组织匀浆制备:按每100 mg肺组织加入0.9 mL PBS(pH 7.4)的比例,冰浴下制成10%匀浆,3000 转·min-1离心20 min,取上清液-20 ℃冻存。
1.2.3 观察指标 根据动脉血气分析结果计算氧合指数(PaO2/FiO2),测定肺系数评价肺水肿的程度。……
