郭 祥，刘红耀，王靖宇

山西医科大学附属第一医院，山西太原 030001

膀胱癌是泌尿系统最常见的肿瘤，目前膀胱肿瘤的治疗手段仍以手术、化疗、放疗及免疫辅助治疗为主。膀胱肿瘤有较高的复发率（40%～80%），除了膀胱肿瘤本身特有的生物学特性外，膀胱肿瘤多药耐药（multidrug resistance，MDR）的产生，是膀胱癌临床化疗失败的主要原因之一[1]。MDR成因很多，其中与P糖蛋白（P-gp）、谷胱甘肽S转移酶（GST）和拓扑异构酶（TOPO）的异常表达有关[2]。怎样逆转MDR成为治疗肿瘤的难点和热点。笔者选用以建立耐阿霉素（ADM）的耐药株，运用不同浓度下的环孢霉素A（CsA）及干扰素-α（INF-α），单独及联合两种药物与ADM共同作用，来探讨其逆转效果。现将结果报道于下：

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要试剂 INF-α （深圳万乐公司），CsA （上海天丰药厂），MTT（噻唑蓝，美国 SIGMA 公司产品），ADM（天津金耀氨基酸有限公司）。

1.1.2 细胞来源 膀胱癌T24/ADM耐药株由山西医科大学附属第一医院泌尿外科刘红耀教授惠赠。

1.2 方法

将实验分成四组实验组，取对数生长期的T24/ADM细胞，以5×105/ml接种于96孔板中，在96孔板中每孔加入25 μl的细胞悬液，于37℃、5%CO2、95%的空气在培养箱中培养24 h，每组各孔均以25 μl加入1.0 mg/L浓度的ADM；第一组中加入不同浓度的 CsA：0.1、1.0、2.0、3.0 μg/ml； 第二组中加入不同浓度的 INF-α：2.0×106、4.0×106、10.0×106、20.0×106U/L；第三组加入 1.0 μg/ml的 CsA 与不同浓度的 INF-α（2.0×106、4.0×106、10.0×106、20.0×106U/L）；第四组加入 2.0×106U/L 的INF-α 与不同浓度的 CsA（0.1、1.0、2.0、3.0 μg/ml）。 每组浓度组均设有3个复孔。最后将实验组和阴性孔（对照组）全部用含有10%胎牛血清的培养基调整至100 μl。于37℃、5%CO2条件下培养24 h。实验终止前6～8 h各孔加入0.5%MTT 50 μl，再培养6 h，显微镜下待细胞对照孔有明显颗粒结晶时，加入10%SDS-HCl 150 μl终止反应，并于 37℃下存放 12 h。……