张继国，张颜波，杨明峰，高允生

(泰山医学院1.药理学教研室、2.附属医院神经内科，山东泰安 271000)

内脏炎症痛作为病理性痛中炎症痛的一种，不同于神经病理性痛，是一种复杂的病理生理现象，其机制与镇痛研究是目前研究的难点、热点之一［1－8］。加巴喷丁作为一种新型抗癫痫药，已广泛应用于神经病理性痛治疗中，在内脏炎症痛中的作用尚不明确［9－11］。我们既往研究表明，蛋白激酶 C(protein kinase C，PKC)在内脏炎症痛起重要作用，PKC激活即膜转位参与内脏炎症痛的形成［1，5－7，12］。故本实验利用甲醛直肠黏膜下注射内脏炎症痛大鼠模型［1，5－7］，通过行为学、电生理学、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Western blot)等技术和方法，观察加巴喷丁对内脏炎症痛大鼠的镇痛作用，及其对PKC膜转位的影响，探讨相关镇痛机制。

1 材料与方法

1.1 试剂与材料 加巴喷丁(gabapentin，Sigma公司，美国)，PKC羊单克隆抗体(一抗，Santa Cruze公司，美国)，辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体(二抗，Bio-Rad公司，美国)，ECL反应底物(Bio-Rad公司，美国)，BCA蛋白分析试剂盒(PIERCE公司，美国)，Gel Doc凝胶成像分析系统(Bio-Rad公司，美国)，钨丝电极(3～5 MΩ)、MD-103型微电极推进器、ME2-8201型微电极放大器、VC-11型记忆示波器(日本光电工业株式会社，日本)，Power Lab数据记录系统(AD Instrument Pty Ltd，澳大利亚)。

1.2 动物及分组 实验选用成年健康Wistar大鼠，体质量200～250 g，♀♂不拘(由山东大学动物中心提供(鲁动质字:200001001))。随机分为对照组:无任何处理，共18只;模型组:甲醛直肠黏膜下注射，共30只;生理盐水组:甲醛直肠黏膜下注射和腹腔内注射生理盐水(100 mg·kg－1)，共30只;加巴喷丁组:甲醛直肠黏膜下注射和腹腔内注射加巴喷丁(100 mg·kg－1)，共30只;生理盐水组、加巴喷丁组均在腹腔注射给药后40 min造模。……