万巧凤，顾立刚，殷胜骏，葛东宇，李根茂

(1.北京中医药大学中医药抗病毒教育部重点实验室，北京 100029;2.宁夏医科大学，宁夏 银川 750004)

黄芩苷(Baicalin，BAI)是从中药黄芩(Scutellaria baicalensis)中提取的多酚羟基黄酮类单体，具有抑菌［1］、抗炎［2］、抗肿瘤［3］、调节免疫功［4］能等多种生物学作用。黄芩苷(960～1 500 mg·kg－1)对甲型流感病毒感染导致的小鼠死亡有良好的保护作用，可明显降低肺内流感病毒的血凝滴度和感染力，对小鼠肺组织炎性病变也有一定的防治作用［5］。本课题组前期体外实验结果表明，黄芩苷可拮抗甲型流感病毒抑制的细胞增殖，调控细胞周期分布，通过抑制 Caspase-8的激活进一步抑制 Caspase-3的活性而拮抗流感病毒感染诱导的细胞凋亡［6］。本实验制备了小鼠甲型流感病毒性肺炎模型，通过检测肺组织细胞凋亡受体途径FAS(CD95)、FAS-L(CD178)及凋亡关键酶Caspase-3的mRNA和蛋白的表达，初步探讨黄芩苷体内抗流感病毒感染的作用机制，以期为抗甲型流感病毒药物研发提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物与流感病毒 ICR小鼠，清洁级，体质量13～15g，小鼠及饲料均由北京维通利华实验中心提供。流感病毒亚甲型鼠肺适应株FM1由中国中医药研究院中医所提供，于9日龄鸡胚尿囊腔连续传代3次后，测血凝滴度为2－9，测定其对小鼠的半数致死量 (LD50)为10－5.75，确定造模浓度为10倍LD50。

1.1.2 实验药品与试剂 黄芩苷，纯度92%，由辽宁中医药大学初正云教授惠赠;利巴韦林(ribavirin，RBV)颗粒，四川百利药业有限责任公司，批号100725。TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(北京中昊生物，批号1103110)，TRIzol(Invitrogen公司)，两步法……