APP下载

五步蛇毒纤溶组分FⅨcaⅠ的分离纯化和生物活性的测定

2011-07-28杨亚萍陈家树

中国药理学通报 2011年11期

杨亚萍,刘 涛,陈家树,林 熙

(1.暨南大学分析测试中心,广东广州 510632;2.中山大学医学院药理学教研室,广东 广州 510080;3.暨南大学医学院药理学系,广东广州 510632)

蛇毒中除了含有多种致命的神经毒素和细胞毒素外,还含有许多作用于人凝血-纤溶系统的蛋白酶和活性多肽[1-2]。尖吻蝮蛇,又称五步蛇,是我国特有的剧毒蛇种,分布广泛,资源丰富,富含纤溶成分。Liang等[3]已从安徽产五步蛇毒中提取出纤溶酶FⅡa,该组分具有无出血活性,分子量低,纤溶活性强等优点,其基因工程产品亦具有广阔的应用前景。但该蛇毒中是否还存在更具开发价值的纤溶组分,尚不得而知。本研究选用安徽产五步蛇毒干粉,着力于该蛇毒中另一纤溶组分FⅨ的研究,试图从中分离纯化出一种分子量更低,活性更强的新纤溶组分,并对其生化特征和生物学活性等相关内容进行研究。

1 材料与方法

1.1 材料 五步蛇(安徽产)粗毒冻干粉由广州医学院蛇毒研究所提供;DEAE-Sephadex A-50、Sephadex G-75、Sephadex G-50(美国 Parmacia Biotech);Chelating Sepharose Fast Flow(美国Amersham Bioscience);人凝血酶(珠海经济特区生物化学制药厂);牛纤维蛋白原、纤溶酶、标准蛋白质(美国 Sigma Aldrich);尿激酶(广东天普生化医药股份有限公司);昆明系小鼠30只(粤检证字05A064),由中山大学实验动物中心提供。

1.2 仪器 可见/紫外分光光度计、微型双垂直板电泳槽、恒压恒流电泳仪(美国Bio-Rad),J-21型高速离心机(美国 Beckman),电子天平(德国Sartorius),真空冷冻干燥机(美国labconco),凝胶成像设备(英国 UVI-tech公司),BS-100A自动部分收集器、BS-160A自动部分收集器(上海沪西分析仪器厂),凝胶成像设备(英国 UVI-tech公司)。

1.3 方法……

登录APP查看全文