沈龙海，安泳潼，杨庆尧，杨晓彤，沈 旭，丁 宏

(1.上海医药工业研究院创新药物与制药工艺国家重点实验室，上海 200437;2.上海芝草生物技术有限公司，上海 200233;3.中国科学院上海药物研究所，上海 201203)

冬虫夏草是我国传统的药用真菌，作为强壮滋补药物。但天然虫草产量很低，资源紧缺，价格高昂，利用液体深层发酵培养冬虫夏草菌丝体、提取物或发酵液，是解决冬虫夏草药源的一种有效途径［1］。中国被毛孢菌丝体提取物(HSW)是以发酵工艺生产而取得的冬虫夏草替代品。冬虫夏草可增强机体免疫力、减轻皮质线粒体损伤，从而改善肾功能［2］。本研究采用体外培养的人肾小管上皮细胞株(HK2)模型，观察HSW对于肾衰竭相关功能指标的影响，并在庆大霉素致急性肾衰竭(ARF)模型上验证HSW的作用。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂 HK2:由中国科学院上海药物研究所沈旭课题组传代培养。中国被毛孢菌丝体提取物(Hirsutella sinensis extract，HSW)，由上海芝草生物技术有限公司实验室保存菌株yy090701经深层发酵水提获得，批号:yyHs-E201005。马兜铃酸(aristolochic acid，AA)、黄亮硫罗丹明(SRB)购自Sigma 公司。Premix Ex Taq、RNAiso plus、Primescript RT reagent kit购自TaKaRa;DEPC水购自碧云天生物公司。庆大霉素注射液，上海现代哈森(商丘)药业有限公司生产，批号:10040512。

1.2 仪器 荧光定量实时检测PCR仪、PCR仪，购自MJ Rearch，酶标仪购自 Bio-red。HITACHI7080生化自动分析仪，和光(WAO)试剂，由和光纯药工业株式会社制造。

1.3 实验动物 50只♂ SD大鼠，体质量180～200 g，由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供［SCXK(沪)2008-0016］，SPF 级。

1.4 方法

1.4.1 HSW基于HK2细胞模型肾损伤的体内研究

1.4.1.1 HSW对马兜铃酸造成的细胞损伤的逆转作用 HK2细胞点板……