马丽媛，李 林，江 玉，史丽颖，冯宝民，王永奇，唐 玲

(大连大学1.生命科学与技术学院、2.药物研究所，辽宁大连 116622;3.Kansas State University，Human Nutrition，Kansas，USA 66502)

油 茶 (Camellia oleifera Abel.)系 山 茶 科(Theaceae)山茶属油茶组植物［1］。全世界的油茶主要分布在我国的长江流域及其以南地区［2－3］。目前，我国共有油茶林资源大约5 500万亩，主要分布在我国17个省(区)。油茶树结出的果实称油茶籽或茶子心，可用来提炼茶籽油即茶油，是一种绿色、生态和高营养的保健食用油，为食用油中的珍品，堪称“东方橄榄油”［4］。茶麸系油茶果实榨除茶油的废弃残渣，茶麸药用称茶子饼，为中药大辞典和岭南草药志所收载［5］。油茶皂苷(youchasaponin)系茶麸中皂苷类成分的总称。本课题组已制备获得皂苷含量在95%以上的油茶总皂苷［6－7］，而且前期研究表明油茶皂苷体内对移植性小鼠S180肉瘤具有不同程度的抑制作用，为继续探讨油茶皂苷的抗肿瘤作用，本文拟从体外试验角度研究油茶皂苷对人肝癌细胞HepG2的作用及可能涉及到的作用机制。

1 材料

1.1 药品与试剂 油茶皂苷由大连大学生命科学与技术学院生物技术教研室制备，其总皂苷含量＞95%。细胞培养所用油茶皂苷先用无菌PBS配制后再用DMEM培养液稀释至所需浓度。

DMEM(High Glucose)培养液(Hyclone，美国);四甲基偶氮唑蓝(MTT，Sigma，美国);兔抗人Caspase-3抗体，兔抗人PARP抗体，兔抗人Bip抗体，兔抗人Perk抗体，兔抗人eIF2a抗体，小鼠抗人p-eIF2a抗体，小鼠抗人eEF2抗体，兔抗人p-eEF2抗体，小鼠抗人β-actin抗体(Cell Signaling Technology，美国);Rabbit polyclonalto IRE1和 Rabbit polyclonalto ATF6抗体(Abcam，美国)。

1.2 细胞及培养 人肺癌细胞(A549)、人乳腺癌细胞(MCF-7)、人肝癌细胞(HepG2)、均购自中国典型培养物保藏中心(CCTCC)。

将A549、MCF-7和HepG2 cell分别用含有10%胎牛血清的DMEM培养基培养，同时加入1×105U·L－1链霉素和 1 ×105U·L－1青霉素，于 37℃、5%CO2培养箱中全湿培养，每2～3天换液1次。……