王春波，孙 霞，李金莲，韩彦弢，陈雪红，谢 靖

(1.青岛大学医学院，山东青岛 266071;2.滨州医学院，山东 烟台 264003)

线粒体是细胞生命活动的控制中心，它不仅是细胞呼吸链和氧化磷酸化的中心，而且是细胞凋亡的调控中心。解偶联蛋白2(uncoupling protein 2，UCP2)是线粒体内膜质子转运蛋白家族的成员之一，在哺乳动物多种组织中广泛表达，通过使氧化磷酸化解偶联，降低线粒体内膜电势，减少细胞内活性氧(reactive oxygen species，ROS)的产生，参与多种组织的抗氧化应激损伤［1－2］。研究已证实［3］，UVA主要是通过诱导角质形成细胞内ROS过度积累而引发凋亡的，高浓度的ROS极易氧化损伤线粒体内膜、DNA等超微结构，导致线粒体功能丧失，最终引起细胞氧化损伤。紫外线照射对UCP2是否会有影响，UCP2在UVA诱导的HaCaT细胞损伤中有何作用?目前国内外尚未见报道。本实验旨在观察UVA照射后HaCaT细胞UCP2表达的变化，并应用海洋抗氧化剂扇贝多肽(polypeptide from Chlamys farreri，PCF)，观察其对 UVA照射后 ROS释放、UCP2表达及线粒体凋亡途径、线粒体呼吸链复合酶活性的影响，探究扇贝多肽对UVA损伤HaCaT细胞线粒体功能的保护作用。

1 材料与方法

1.1 主要试剂和器材 PCF由中国水产科学研究院黄海水产研究所分离纯化;DMEM培养基、胰蛋白酶购自Gibco公司;胎牛血清购自杭州四季青公司;UCP2多克隆抗体购自Millipore公司;Apaf-1、Cyt C多克隆抗体购自Cell Signaling公司;β-actin抗体购自北京博奥森生物技术有限公司;线粒体提取试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司;线粒体呼吸链复合物I活性定量检测试剂盒购自Genmed公司。紫外辐照仪由北京师范大学光电仪器厂制造。……