左西孟旦对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用
2011-07-16于明懂高春霖吕国义邓廼封
于明懂 高春霖 吕国义 邓廼封
心脏停搏液在心脏外科手术期间具有良好的心肌保护作用,其作用直接关系到手术成功与否及术后心功能的恢复情况。左西孟旦(1evosimendan,Levo)是新一代Ⅱ型钙离子(Ca2+)增敏剂,对缺血-再灌注心肌有良好的保护作用,能开放ATP敏感的K+通道(KATP)而具有药物学缺血预处理作用[1]。本研究旨在观察在去极化心脏停搏液中加入不同浓度左西孟旦对缺血再灌注心肌损伤的影响,并分析其可能的作用机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物和分组 健康雄性Wistar大鼠32只,体质量250~300 g,购于北京军事医学科学院实验动物中心,清洁级,随机分为4组(n=8),L0组为对照组:用去极化停搏液St.Thomas’Ⅱ(STH-2)停搏;L0.03组:STH-2中加入 Levo 0.03 μmol/L;L0.3组:STH-2加入Levo 0.3 μmol/L;LG组:STH-2中加入Levo 0.3 μmol/L和格列苯脲10 μmol/L停搏。
1.2 主要试剂及仪器 左西孟旦(常州亚邦制药有限公司),格列苯脲(上海化学试剂厂)。K-H液(mmol/L):NaCl 118.5、KCl 4.8、葡萄糖 11.0、CaCl21.8、KH2PO41.2、NaHCO325.0、Mg⁃SO4·7H2O 1.2。STH-2 停 搏 液(mmol/L):NaCl 110.0、KCl 16.0、CaCl21.2、NaHCO310.0、MgCl·26H2O 16.0(所有试剂均为国产分析纯)。磷酸肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。改良Langendorff灌注模型(国产自组装);BS223S电子分析天平(北京赛得利斯仪器系统有限公司),cc7-104-23-017型DATEX多功能监测仪(Datex公司,芬兰),SCW-PTO1型压力传感器(深圳益心达医学新技术有限公司)。
1.3 实验方法
1.3.1 动物模型的建立 于大鼠腹腔注射3%戊巴比妥30 mg/kg、肝素500 IU/kg,麻醉后迅速开胸取出心脏,放入盛有4℃K-H液的玻璃皿中,修剪主动脉根部周围组织,游离主动脉,悬挂于改良Langendorff心脏灌流装置上,结扎固定,恒压灌注,剪开肺动脉圆锥以开放冠脉流出道,剪开左心耳,将与压力传感器连接的乳胶水囊经左心房通过二尖瓣置于左心室,然后将心脏置于37℃保温缸内,向球囊内缓慢注入生理盐水,调解乳胶水囊压力,使左心室舒张末压(LVDP)维持在8~10 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)。……
