天津市畜牧兽医研究所 乔家运 李 平 陈龙宾 王文杰＊

单宁也称单宁酸，是一种存在于植物中的水溶性聚酚类物质，分子质量为500～3000 Da。单宁的化学性质活泼，饲料中的单宁易与蛋白质结合，因此具有抗营养作用；单宁抑菌作用的存在，也会限制食草动物对营养物质的利用（Frazier等，2010；Getachew 等，2008；Li等，2006）。 采用生物降解的方法，开展了对植物单宁生物降解的研究，通过单宁降解菌的作用，将分子质量较大的单宁降解为小分子化合物，从而降低或消除单宁的抗营养作用。在前期的研究中，从霉变葡萄中筛选出了一株具有单宁降解能力的黑曲霉 （乔家运等，2011），本研究考察时间、温度、初始pH等外界条件对菌株降解单宁的影响，以提高菌株对单宁的降解能力。

1 材料与方法

1.1 菌株 黑曲霉SL-5（由中国科学院微生物研究所鉴定），由本实验室筛选。

1.2 培养基 察氏培养基，NaNO33.0 g/L，K2HPO41.0 g/L，KCl 0.5 g/L，MgSO40.5 g/L，FeSO40.01 g/L，蔗糖 30 g/L，121 ℃灭菌 20 min。

发酵培养基，在无糖察氏液体培养基中加入0.5%的水解单宁（国药集团化学试剂有限公司），用于单宁降解率的测定。

1.3 培养时间对降解率的影响 250 mL三角瓶中加入50 mL发酵培养基，按5%接种量接种菌悬液，初始pH 7.0、28℃、180 r/min条件下，分别摇床培养 1、2、3、4、5 d，测定单宁降解率，考察培养时间对降解率的影响。

1.4 培养温度对降解率的影响 250 mL三角瓶中装入50 mL发酵培养基，按5%接种量接种菌悬液，初始pH 7.0、180 r/min条件下，分别在20、25、28、30、32、35 ℃温度下培养 3 d， 测定单宁降解率，考察培养温度对降解率的影响。

1.5 初始pH值对降解率的影响 250 mL三角瓶中装入50 mL发酵培养基，按5%接种量接种菌悬液，在28℃、180 r/min条件下，分别在初始pH 6、6.5、7、7.5、8 时培养 3 d， 测定单宁降解率，考察初始pH对降解率的影响。……