刘 炜，孙 颖，曾蔚欣，刘礼斌，唐宛晨，孙路路

(1.首都医科大学附属北京世纪坛医院，北京 100038； 2.北京市朝阳区药品检验所，北京 100023)

尿素乳膏是本院的传统制剂，该药能增加角质层的水合作用，使皮肤柔软，用于鱼鳞病，手、足皲裂及皮肤干燥等。但其现行质量标准中无主要成分的含量测定。为更好地控制该制剂质量，本研究采用紫外分光光度法测定尿素的含量[1]。

1 仪器与试药

紫外-可见分光光度仪：HP- 8453E；天平：METILER AE240。尿素对照品(中国食品药品检定研究院，批号100288-200201)；尿素原料药(湖南芙蓉制药有限公司，批号101202，含量99.7%)；尿素乳膏(首都医科大学附属北京世纪坛医院制剂室制，批号20110209、20110605、20110607)；纯化水：自制；其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1溶液的配制

2.1.1对二甲氨基苯甲醛溶液的配制 取对二甲基苯甲醛2 g，加乙醇96 ml与盐酸4 ml使溶解，即得。

2.1.2尿素对照溶液的配制 精密称定尿素50 mg，置100 ml量瓶中，加入适量乙醇，完全溶解后，继续加入乙醇至刻度，摇匀，备测。

2.1.3样品溶液的配制 取本品适量，精密称定250 mg(约相当于尿素50 mg)，置50 ml烧杯中，加乙醇20 ml，置水浴中加热使溶解，移至冰浴中冷却1 h，滤过，滤液置100 ml量瓶中，用乙醇洗涤容器及滤器，洗液并入量瓶中，放至室温，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为样品溶液，备测。

2.1.4空白基质溶液的配制 按处方配制不含尿素的空白基质，称定250 mg，按“2.1.3”方法制备空白基质溶液，备测。

2.2测定法 精密量取对照溶液、样品溶液和空白溶液各3 ml，分别置25 ml量瓶中，各精密加入“2.1.1”项下对二甲氨基苯甲醛溶液10 ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀，暗处放置15 min后，立即照紫外-可见分光光度法在420 nm波长处，分别测其吸光度。

2.3波长的选择 按“2.2”项下方法，自暗处放置15 min 后，立即照紫外-可见分光光度法在300～500 nm扫描，见图1。

A.样品溶液 B.尿素对照品溶液 C.空白溶液

图1可见：尿素与对二甲氨基苯甲醛显色后，在415～435 nm处有一较为平坦的吸收峰，可以作为比色测定波长。基质在415～435 nm处无吸收，对样品的测定无干扰。参照有关文献[1]，故可选择测定波长420 nm。

2.4线性考查 分别精密量取取“2.1.2”项下配制的尿素对照溶液0.75、1.5、3.0、3.75、4.5和6.0 ml置25 ml量瓶中，再精密加入“2.1.1”项下对二甲氨基苯甲醛溶液10 ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀。在暗处放置15 min后，立即在420 nm波长处分别测吸光度，并以浓度为横坐标、吸光度为纵坐标绘制标准曲线。求得回归方程为Y= 0.007 1X-0.000 5(r=0.999 8)，尿素在15～120 μg/ml范围内，浓度和吸光度具有良好的线性关系。

2.5回收率试验 精密称取尿素原料药约50 mg，加入处方量的空白基质，制成含量分别为80%、100%、120%样品，每一浓度3份，共9份。每一份样品测定6次。再按“2.1.3”样品溶液的配制方法，制备高、中、低浓度供试品溶液。取高、中、低浓度供试品溶液、尿素对照溶液各3 ml，分别至25 ml量瓶中，各自精密加入对二甲氨基苯甲醛溶液10 ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀，暗处放置15 min后，立即在420 nm波长处分别测吸光度，得平均回收率为99.2%，RSD为0.7%，见表1。

表1 回收率试验结果

2.6重复性考查 取同一批号样品6份，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液分别取样品溶液、尿素对照溶液各3 ml至不同的25 ml量瓶中，各自再精密加入对二甲氨基苯甲醛溶液10 ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀，暗处放置15 min后，立即在420 nm波长处分别测吸光度。测定值的RSD为0.3%(n=6)，表明本法具有良好的重复性。

2.7稳定性考查 取“2.5”项下配制的溶液，分别于4、8、12和24 h，测其吸光度，测定值的RSD为0.2%。

2.8样品的测定 取样品，按“2.5”项下方法，测定尿素含量，连续测量3次。结果批号为20110209、20110605和20110607三批尿素乳膏中尿素含量分别为99.6%、94.3%和99.4%，RSD分别为0.3%、0.5%和0.2%。

3 讨论

尿素可与对二甲氨基苯甲醛形成有色化合物，但该化合物不稳定。试验中观察到尿素标准溶液加试剂显色后分别于15、30、45、60、75、90和120 min不同时间测定吸光度。结果表明，常温避光15～45 min吸光度稳定，RSD为0.08%；其60、75、90和120 min的吸光度与显色后相比，RSD分别为0.75%、1.2%、1.8%和3.1%。故测定应在15～45 min内进行。

本法测定尿素乳膏中尿素含量简便、快捷、准确、重复性好，可用于该制剂的质量控制。

1 中国药典.二部.2010：379