骆耐香 刘 菁 (桂林医学院微生物学与免疫学教研室,桂林 541004)

恶性肿瘤已成为危害人类健康的主要疾病,由于传统手术、化疗和放疗的疗效不尽人意,人们期盼着更加有效的治疗方法。通过向肿瘤患者输注具有抗肿瘤活性的免疫效应细胞的肿瘤过继免疫治疗,可以直接杀伤或激发机体免疫反应而杀伤肿瘤细胞,达到治疗肿瘤的目的。肿瘤细胞通常表达肿瘤特异性抗原(TSA)或/和肿瘤相关抗原(TAA),由于胸腺的选择机制和耐受机制,机体针对它们产生的T淋巴细胞中大多数T细胞受体(TCR)的亲和力都比较低,从而限制了其对肿瘤识别及杀伤效果。而过继免疫治疗可通过体外扩增筛选出高活性的免疫效应细胞,将其转入宿主体内可有效地诱导机体识别这些抗原,并建立长期的特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)的靶向杀伤肿瘤细胞的效应,克服了疫苗免疫治疗的诸多缺陷,具有良好的应用前景,目前已经成为肿瘤免疫治疗中十分活跃的研究领域[1]。

我们将构建好的含识别TAA的单链抗体(scFv)和T淋巴细胞的活化基序的嵌合免疫受体3(CIR3)转染人T淋巴细胞后,检测其在人T淋巴细胞的表达情况、与癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)阳性胃癌细胞株MKN-45的结合情况,及检测其能否分泌细胞因子IL-2,为下一步的体内实验提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 主要仪器和材料 RT-PCR盒购自日本Toyama公司;电穿孔仪NucleofectorTM为Amaxa Biosystems公司产品;流式细胞仪FACS Calibur为美国BD Biosciences公司产品;培养基AIM-V、RPMI1640购自Sigma公司;羊抗人IL-2、生物素标记的羊抗人IL-2等抗体……