亢 勤

河南省建筑医院内科郑州450001

慢性乙醇中毒性痴呆是长期大量饮酒引起躯体与精神记忆障碍相关的一类疾病［1-2］。文献［3］报道，酒精接触能显著抑制与记忆力、认知相关的脑细胞的增殖，降低细胞存活率，诱导脑细胞变性、萎缩，进而出现一系列精神症状。作者建立慢性乙醇中毒模型小鼠，利用水迷宫实验观察其学习记忆功能的变化，免疫组织化学和免疫印迹法检测脑组织凋亡相关蛋白Caspase-3表达的改变，探讨慢性乙醇中毒引起脑功能退化的可能机制。

1 材料与方法

1.1 材料 ①主要试剂:兔抗鼠激活型Caspase-3多抗购自美国Promega公司;Caspase-3 antibody购自Santa Cruz公司;FITC标记羊抗兔IgG购自北方同正生物科技有限公司。无水乙醇等其他试剂除特别注明外均为国产分析纯。②实验小鼠:c57BL/6小鼠由河南省实验动物中心提供，体质量20～30 g，雌、雄各半。单笼饲养，室温控制在20～25℃，相对湿度60%～70%，定期更换垫料消毒。采光控制为8 h光照，16 h黑暗。自由进食水，食物为河南省实验动物中心提供的小鼠标准饲料，饮用水选用实验室自制单蒸水。

1.2 实验分组 小鼠随机分3组，即正常对照组、低剂量组和高剂量组，每组6只，雌雄各3只。高、低剂量组参照目前国内通用的灌胃方式［4-5］制备慢性乙醇中毒模型:小鼠自由饮食，每日9:00禁食、水，2 h后，低剂量组灌胃无水乙醇2.4 mL/d，高剂量组灌胃无水乙醇4.8 mL/d。正常对照组灌入等量的生理盐水。灌胃后恢复正常饲养。每组小鼠饲养期间每日16:00观察行为学表现。

1.3 观测指标

1.3.1 行为学观察 采用Morris水迷宫实验测定。水迷宫由圆形水池和自动录像及分析系统两部分组成。……