赵彦坡，秦 洁，孙石磊

郑州大学第一附属医院神经内科郑州450052

缺血性脑卒中是神经系统常见的多发病，随着溶栓、介入等诊疗技术的开展，缺血再灌注所带来继发性损伤凋亡逐渐得到重视，抑制缺血半暗区神经细胞迟发性损伤成为治疗的目标［1-2］。非竞争性N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-Daspartate，NMDA)受体拮抗剂美金刚，已频繁用于帕金森病、老年痴呆、痉挛性疾病及病毒感染性疾病的治疗，且无严重的毒副作用［3］。对于该药的研究集中于抑制兴奋性氨基酸及钙离子内流作用机制上，阻止缺血再灌注所继发的迟发性损伤机制仍需进一步探究。抑制细胞凋亡蛋白酶3(天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3)(cystein-containing aspartate-specific protease-3，Caspase-3)反应活性，阻止细胞凋亡，抗膜脂质过氧化，保护膜脂质稳定性可能是又一作用机制。该研究通过建立大鼠脑缺血再灌注模型，观察美金刚对大鼠脑皮质神经元Caspase-3表达和丙二醛(malon-aldehyde，MDA)含量的影响，了解NMDA受体拮抗剂的神经保护作用机制。

1 材料与方法

1.1 主要仪器及试剂 WFZ UV-2000型分光光度计(上海尤尼柯)，显微照相系统(德国Lecia光学检测仪器)，分析系统(上海山富科学仪器有限公司，Biosens Digital Imaging System v1.6);免疫组织化学Caspase-3单抗(美国 Epitomics公司)，Caspase-3、MDA活性检测试剂盒、Bradford蛋白浓度测定试剂盒(江苏碧云天);美金刚(批号:843101，每片10 mg，丹麦灵北制药厂)。

1.2 动物分组和模型制备 健康雄性Wistar大鼠135只(河南省实验动物中心提供)，体质量260～280 g，随机分为假手术组、模型组和干预组3组，每组45只。参照线栓法［4］，建立左侧大脑中动脉闭塞(MCAO)模型，缺血90 min后拔出栓线形成再灌注，出现左侧Horner征及对侧肢体运动障碍为模型成功，假手术组仅分离血管，不插栓线。……